人血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒

下是关于人血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒的实验说明书要点整理：

　　BS-0130 人血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒

　　一、检测原理

　　采用双抗体夹心法(ELISA)：

　　预包被PDGF抗体的微孔板捕获样本中的PDGF

　　依次加入HRP标记检测抗体形成复合物

　　TMB底物显色(蓝色→黄色)，颜色深度与PDGF浓度正相关

　　450nm测OD值，通过标准曲线计算浓度

　　二、试剂盒组成

　　典型配置包括：

　　预包被酶标板(96孔)

　　PDGF标准品(冻干粉，通常20ng/ml)

　　酶标抗体工作液

　　样品稀释液(10×/20×浓缩)

　　TMB底物溶液

　　终止液(2N H₂SO₄)

　　浓缩洗涤液(20×)

　　三、样本处理

　　血清‌：3000g离心10分钟，避免溶血

　　血浆‌：EDTA/肝素抗凝，3000g离心30分钟

　　细胞上清‌：3000g离心10分钟去沉淀

　　保存‌：2-8℃可存48小时，长期需-20℃/-70℃冻存，避免反复冻融

　　四、标准曲线制备

　　标准品梯度稀释(通常6-8个浓度点)

　　示例稀释方案：

　　起始浓度20ng/ml

　　倍比稀释至0.312ng/ml

　　空白孔用稀释液对照

　　五、实验步骤

　　加样‌：标准品/样本各50μl，设复孔

　　孵育‌：37℃温育1-2小时

　　洗涤‌：自动洗板机或手动洗板5次

　　显色‌：加TMB避光反应15-30分钟

　　终止‌：加终止液后30分钟内检测

　　六、注意事项

　　所有试剂使用前需平衡至室温

　　严格控制反应时间和温度

　　避免酶标板孔间交叉污染

　　显色后若出现沉淀需重新离心

　　不同批次试剂不可混用

　　七、结果分析

　　计算标准曲线回归方程(建议R²>0.99)

　　样本浓度需乘以稀释倍数

　　典型检测范围：0.312-20ng/ml，灵敏度约0.125ng/ml

　　注：具体操作请以实际试剂盒说明书为准，不同厂商可能存在参数差异。实验需配备酶标仪、移液器、离心机等基础设备。

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