在生命活动的精密调控网络中,核酸酶犹如一位“分子剪刀手”,扮演着不可或缺的核心角色。作为一类能够催化核酸(DNA或RNA)水解断裂的酶类分子,它广泛存在于原核生物、真核生物乃至病毒等各类生命体中,是维持基因组稳定性与核酸代谢平衡的关键执行者。从细胞分裂时的DNA修复、基因重组,到mRNA的降解与周转,再到抵御外源核酸入侵的免疫防御,核酸酶的身影贯穿于遗传信息传递、表达调控及生命稳态维持的全过程。
图1. 部分核酸酶作用示意图
随着分子生物学技术的飞速发展,核酸酶的应用早已突破基础生命科学研究的边界。无论是揭示生命奥秘的实验室,还是守护人类健康的医疗前线,核酸酶都凭借其独特的分子切割特性,成为连接基础研究与产业应用的重要桥梁。作为分子酶领域的专业生产商,翌圣已打造出一系列高纯度、高活性的核酸酶产品,为科研与产业应用提供坚实支撑。
一秒分清两类核心核酸酶
从作用机制来看,核酸酶可分为核酸外切酶与核酸内切酶,二者在实验中各司其职:
核酸外切酶
核酸外切酶如同“逐段裁剪的工匠”,需依赖核酸链的游离末端,主要从5'端或3'端逐次水解核苷酸,将核酸逐步降解为单个核苷酸或寡核苷酸片段,常用于核酸降解回收、测序前纯化等场景。
核酸内切酶则像“精准定点的剪刀”,无需依赖末端结构,可识别核酸链内部特定序列或结构并直接切割,在基因编辑、病原体检测等精准操作中不可或缺。
表1和表2分别整理了翌圣核酸内切酶和核酸外切酶的核心特性及应用场景,助您快速匹配实验需求。
表1.翌圣核酸内切酶选择指南
表2.翌圣核酸外切酶选择指南
硬核数据验证
翌圣核酸酶实力媲美进口!
Recombinant DNase I (RNase-free, Yeast) (14549ES)
超强消化活性,媲美进口品质:分别使用不同投入量的翌圣及进口品牌Supplier A的DNase I对1 μg质粒DNA进行消化处理,结果显示翌圣14549ES对质粒DNA去除效率媲美Supplier A。
图2.质粒DNA去除效果验证
RNA友好无损伤:为评估翌圣生物Recombinant DNase I (RNase-free, Yeast) (Cat#14549)在RNA提取中的应用效果,取20 U该酶制剂处理12例不同来源的小鼠肝脏前处理样本。经后续RNA提取及琼脂糖凝胶电泳分析证实,该酶处理组RNA完整性良好,表明此DNase I在有效消化DNA的同时,不会对RNA质量产生影响,完全满足RNA提取实验的技术要求。
图3.RNA提取应用验证
Thermolabile dsDNase (14544ES)
消化活性强,65℃加热10 min即可快速失活:将3批次翌圣 Thermolabile dsDNase与厂家A、B的dsDNase同步进行消化能力和灭活效果对比,结果显示,翌圣3批次Thermolabile dsDNase在0.2 U投入量下,即可消化1 μg小牛胸腺DNA,Thermolabile dsDNase经过65℃孵育10 min可完全失活,消化活性与热灭活效果与厂家A、B一致。
图4.Thermolabile dsDNase热敏感性验证结果图
Micrococcal Nuclease (14547ES)
DNA底物切除能力与进口品牌A*一致:分别使用翌圣的Micrococcal Nuclease与进口品牌A*的同类产品切除1ug λ DNA底物,50 uL体系,37℃反应15min。琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,翌圣Micrococcal Nuclease与进口品牌A*的切除效果一致。
图5.DNA底物切除能力验证
T7 Endonuclease I (14548ES)
切割活性强:使用翌圣和来自进口Supplier A*的T7 Endonuclease I分别与含有错配碱基的dsDNA底物进行孵育,并通过琼脂糖凝胶电泳分析谱带变化。实验结果表明,翌圣20 U的T7 Endonuclease I能有效切割200 ng含有错配碱基的dsDNA,且切割效果媲美来自进口Supplier A*的T7 Endonuclease I。
图6.T7 Endonuclease I切割效果验证(注:底物投入量-200ng)
参考文献
[1] Ndiaye C, Mena M, Alemany L, et al. HPV DNA, E6/E7 mRNA, and p16INK4a detection in head and neck cancers: a systematic review and meta-analysis[J]. The Lancet Oncology, 2014, 15(12): 1319-1331..
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[4] Mol C D, Kuo C F, Thayer M M, et al. Structure and function of the multifunctional DNA-repair enzyme exonuclease III[J]. Nature, 1995, 374(6520): 381-386.
翌圣生物
翌圣生物科技(上海)股份有限公司成立于2014年,是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料,从事核苷酸、蛋白、细胞和类器官四大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。公司兼备核心技术自主研发和规模化生产能力,核心产品数量达数千种,覆盖分子克隆、qPCR、NGS、体外转录、抗体、蛋白纯化及分析、细胞培养、转染、报告基因检测和类器官等多种系列,广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
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