毛细管凝胶电泳法（CGE-LIF）分析宿主细胞残留DNA的片段分布

生物制品中的疫苗、重组蛋白药、抗体药等产品多采用连续传代的动物细胞株表达生产。虽然经过严格的纯化工艺，但产品中仍有可能残余宿主细胞的DNA片段。这些宿主细胞残留DNA（HCD）可能带来传染性或致瘤性风险。

现有研究表明，一个功能基因至少在200 bp以上，因此残留DNA片段越大，风险等级越高。美国食品药品监督管理局（FDA）关于人类基因ZL新产品生产指导文件中明确指出HCD的片段要小于200 bp；国家药品监督总局（NMPA）生物制品药学部同样在基因ZL产品药学研究与评价技术指导原则的征求意见稿中指出，HCD的片段要小于200 bp。因此基因ZL终产品中需要合适的方法检测HCD的片段大小分布情况。

图1 PA800 Plus药物分析系统与dsDNA 1000 试剂盒

使用SCIEX PA800 Plus药物分析系统，结合激光诱导荧光检测器（LIF）和dsDNA 1000 试剂盒（货号477410）（图1），可对HCD进行片段分布检测。

该毛细管凝胶电泳（CGE-LIF）方法具有如下特点：

 · 分布范围：可检测50 bp-1000 bp的片段大小，且可进行条件优化检测长至15 kb的片段大小。

 · 灵敏度：可检测10 pg/mL的片段浓度，若在前处理的过程中对DNA进行浓缩处理，可获得更高的检测灵敏度， 满足各种残留DNA检测的要求。

 · 操作方便：具有商品化的样品前处理试剂盒和分离试剂盒。

 · 符合法规：仪器具有操作（OQ）认证，操作软件能够进行权限设置和审计追踪。

图2 CGE-LIF方法分析DNA片段标准品的大小

参考文献：

Xuan Shen, Xiaomu Chen. Size analysis of residual host cell DNA in cell culture-produced vaccines by capillary gel electrophoresis. Biologicals 41 (2013) 201-208