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Copure|草莓果酱、风味发酵乳和紫薯吐司中胭脂虫红的测定

来源:深圳逗点生物技术有限公司 更新时间:2025-03-07 17:15:11 阅读量:102
导读:Copure?|草莓果酱、风味发酵乳和紫薯吐司中胭脂虫红的测定




一、 样本前处理





样品提取

     1.1 草莓果酱

  • 称取2g(精确至0.001g)试样于50mL离心管中,加入盐酸溶液(2.0mol/L)40mL,旋紧盖子,摇匀,置于沸水浴中加热30min,取出冷却至室温后,振荡5min,超声5min,10000r/min离心5min,上清液转移至50mL容量瓶中,用水定容至刻度,从中准确移取25mL样液做为待净化液。

     1.2 风味发酵乳

  • 称取2g(精确至0.001g)试样于50mL离心管中,加入盐酸溶液(2.0mol/L)40mL,旋紧盖子,摇匀,置于沸水浴中加热30min,取出冷却至室温后,振荡5min,超声5min,加入沉淀剂(183g/L乙酸锌溶液2mL、92g/L亚铁氰化钾溶液2mL)涡旋1min,10000r/min离心5min,上清液转移至50mL容量瓶中,用水定容至刻度,从中准确移取25mL样液于50mL离心管中,10000r/min离心5min使样液澄清作为待净化液

     1.3 紫薯吐司

  • 称取2g(精确至0.001g)试样于50mL离心管中,加入盐酸溶液(2.0mol/L)40mL,旋紧盖子,摇匀,置于沸水浴中加热30min,取出冷却至室温后,振荡5min,超声5min,加入沉淀剂(183g/L乙酸锌溶液2mL、92g/L亚铁氰化钾溶液2mL)涡旋1min,10000r/min离心5min,上清液转移至100mL容量瓶中,残渣加入盐酸溶液(2.0mol/L)40mL,常温下,重复提取1次,合并2次提取液,用水定容至刻度,从中准确移取25mL样液于50mL离心管中,10000r/min离心5min使样液澄清作为待净化液。


试样净化(Copure? 胭脂虫红专用柱,150mg,6mL)

  • 活化:使用前依次用6mL甲醇、6mL 2.0mol/L盐酸溶液进行活化,保持柱体湿润;

  • 上样:将待净化液过柱,弃去上样液;

  • 淋洗:用12mL水淋洗,弃去淋洗液,抽干小柱;

  • 洗脱:用6mL磷酸甲醇溶液(2%)进行洗脱,收集洗脱液,于40℃水浴下氮吹浓缩至近干,用磷酸水溶液(0.1%)定容至2mL,涡旋混匀1min,10000r/min离心5min,上清液过0.22μm亲水PTFE滤膜,上机。




二、仪器条件





色谱柱:Copure C18(4.6 х 150mm,5.0μm)

仪器:液相色谱仪,ThermoFisher U3000

流动相:A:磷酸水溶液(0.1%),B:磷酸乙腈溶液(0.1%)

洗脱方式:洗脱梯度程序见表1

流速:1.2 mL/min,柱温:40 ℃,进样量:20μL

检测波长:494nm




三、实验结果





曲线点为5μg/mL的胭脂红酸检测液相色谱图

草莓果酱(本底)中胭脂红酸检测液相色谱图

添加水平为0.02g/kg的草莓果酱中胭脂红酸检测液相色谱图

添加水平为1 g/kg的草莓果酱中胭脂红酸检测液相色谱图

风味发酵乳(畅轻)(本底)中胭脂红酸检测液相色谱图

添加水平为0.006g/kg的风味发酵乳(畅轻)中胭脂红酸检测液相色谱图

添加水平为0.05g/kg的风味发酵乳(畅轻)中胭脂红酸检测液相色谱图

紫薯吐司(本底)中胭脂红酸检测液相色谱图

添加水平为0.02g/kg的紫薯吐司中胭脂红酸检测液相色谱图

添加水平为0.6g/kg的紫薯吐司中胭脂红酸检测液相色谱图


注意事项

1. 因过脱脂棉会损失部分目标物,所以此应用省去了脱脂棉过滤步骤。

2. 处理风味调制乳和紫薯司时,提取后的样液较浑浊,所以选择加入了沉淀剂。

3. SPE小柱活化时改成了“依次用6mL甲醇、6mL 2.0mol/L盐酸溶液”进行活化。

4.不同样品的酸碱性有所不同,避免过柱淋洗过程甲醇淋洗造成损失,此应用只用12mL水淋洗SPE小柱。

5.洗脱液建议氮吹至近干,然后用磷酸水溶(0.1%)定容至2mL。

6.尼龙滤膜会对胭脂红酸有吸附,建议过亲水的PTFE滤膜。





四、订购信息






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