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更简单、更高效!血清中17种全氟化合物的LC-MS/MS检测方法……

来源:北京纳鸥科技有限公司 更新时间:2024-08-07 17:45:10 阅读量:1374
导读:一种更高效、更简单的血清中全氟和多氟化合物的测定……

关于全氟化合物


全氟和多氟化合物(PFASs)是一类新兴的环境内分泌干扰物,常被用于表面活性剂、洗涤剂防火泡沫、皮革制品和食品包装的制造等。由于PFASs中的C-F键具有较强的稳定性,PFASs表现出极强的持久性,并具有生物蓄积性和毒性。目前在土壤、水、大气、灰尘以及食品等介质中均可检测出PFASs。PFASs可以通过饮水、食物、空气等多种途径进入人体。毒理学研究显示 PFASs 具有发育毒性和生殖毒性,可造成肝损伤和慢性肾脏疾病。人体生物监测被认为是最理想的监测和评估手段。血清中PFASs 的浓度水平可以直接反映人体暴露后吸收的水平,因此血清被广泛用作评价PFASs的生物监测基质。


然而血清基质复杂,且现有的检测方法大多采用液液萃取方法,血清样本及试剂消耗量大,且前处理步骤繁琐。因此,建立血液中多种PFASs高效快速、准确定量检测方法尤其重要。




01


创新产品:HMR超效分体96孔板


聚焦生物样品前处理技术,创新推出Anavo HMR超效分体96孔板,助力测定血清中17种全氟与多氟烷基化合物;相比传统的液液萃取前处理过程,优势如下:


01

更少前处理步骤&时间

Anavo HMR超效分体96孔板,采用新型无机固相萃取材料,可选择性去除复杂基质中脂质,无需反复液液萃取提取、超声、离心等步骤,血样可直接上样净化。仅需一步,即可同时在管内完成蛋白沉淀和样品净化。

下面以处理96个样为例,与传统方法进行对比。

从以上对比可以看出,传统方法需要反复超声提取,多次离心取上清液等繁琐步骤,才能完成样品净化,大约需要150min完成前处理。

而HMR超效分体96孔板,一步净化法,可同时在管内完成蛋白沉淀和样品净化,极大简化前处理步骤,耗时仅需50 min,净化时间比传统方法缩短了3倍极大简化前处理步骤,而且大大节省了宝贵的前处理时间。


02

更优的净化效果

HMR无机固相萃取填料特异性吸附磷脂基团,可消除磷脂带来的基质效应问题。

更干净的净化效果,此外,HMR-Lipid特异性吸附磷脂基团,可消除磷脂带来的基质效应问题。


03

更少的上样量

净化小柱采用阶梯式设计+30 μm小粒径填料,同样质量的填料,更高的柱床和理论塔板数,更优净化效果。同时,更少上样量,特别适用于血清等特别珍贵的生物样本的前处理。

传统方法需上样200 μL以上,HMR超效分体96孔板仅需50 μL,大大节省了宝贵的样品。


04

更少的试剂用量

更少的试剂使用量。相比于传统方法,试剂使用量更小,更加环保。


02


血清中17种全氟及多氟烷基化合物测定

1、样品前处理


(1) 准确吸取50 μL血清至HMR超效分体96孔板(货号:AN25M006)中,加入同位素内标工作溶液,沿萃取柱内壁缓慢加入200 μL乙腈,通风柜内放置5 min,待溶液通过筛板进入填料中。

(2) 将HMR超效分体96孔板转移至正压装置上,逐步施加压力,将小柱中的液体完全缓慢排出,液体收集至96孔板中。加入200 μL乙腈,重复提取操作一次。收集两次流出液,40 ℃氮气吹至近干,加入50 μL甲醇-水(1:1,v/v)复溶,放置于96孔板涡旋混匀仪混匀1 min,直接上机检测



前处理注意事项

1、内标体积太小(50、20微升),稍微有损失,就会影响定量,所以建议先加样品、再加内标,最后加乙腈;

2、加液体过程中,一定注意尽量让移液枪的枪头接近净化管中最上层筛板加液。需要正确使用移液枪,特别是小体积加样时;

3、建议分两次加入乙腈。如果只加一次乙腈,可能洗脱不完全,净化管里有残留。压完一次,加入乙腈,再正压;

4、乙腈:血清的比例从3:1开始优化;

5、其他项目根据化合物的性质选择甲醇或乙腈作为提取溶剂。




2、色谱条件

色谱柱:Leosil C18/PFP核壳柱 (2.7μm, 100* 2.1mm)货号:AN80A001;

流动相:5mmol/L乙酸铵甲醇(A),5mmol/L乙酸铵水溶液(B)

流速:0.4mL/min

柱温:40 ℃

进样量:5μL

梯度洗脱程序

3、质谱条件

AB 6500+质谱检测器采用多反应检测模式(Multiple Reaction Monitoring,MRM),ESI负离子模式。

离子源:电喷雾离子源;

扫描方式:负离子扫描;

检测方式:多反应离子监测(MRM);

电喷雾电压:-4500V;

离子源温度:400℃;

辅助气1:60psi;

辅助气2:60psi;

气帘气:30psi;

碰撞气体:Medium。

4、目标PFASs的离子对、锥孔电压、碰撞能量等参数见下表

5、加标回收率和精密度(n=6)

6、谱图

17种PFASs的总离子流图(质量浓度10μg/L

7、结论

本研究建立了人体血清中17种全氟及多氟烷基化合物的高通量固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱检测方法。相比以往液液萃取的提取方法,该方法可以在固相萃取柱中同时实现提取和净化,并且可以与96孔板适配,更加高效便捷,方法准确度高,血清样本用量少,适合开展血清中全氟及多氟烷基化合物大批量检测工作。


03


方法配套关键耗材

04


方法配套仪器

关于Anavo HMR超效分体96孔板

关于纳鸥科

北京有限公司(简称:),集研发、生产、销售于一体,致力于不断研发出更好、更先进的产品,解决客户在检测中遇到的困难,竭力帮助检测工作者优化检测效果、提高检测效率。


自主研发和生产的Anavo产品,包括:高纯多孔硅胶和杂化填料色谱柱、HMR-Lipid高效增强脂质去除、超效分体96孔板、固相萃取柱(SPE)QuEChERS免疫亲和柱离子小柱装置、鬼峰捕集柱、样品瓶滤膜滤器热解析管高纯溶剂等;代理品牌产品,包括:溶剂效应消除器(谱宁发明专利),PerkinElmer色谱柱(原ES Industries),Dr.E/TRC标准品,Sero微量元素质控品、瑞士帝肯酶标仪及前处理设备,BCHP气源及相关仪器等。

400-995-9932   www..com

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