大鼠(IKK)ELISA试剂盒实验使用说明书
BS-8621大鼠(IKK)ELISA试剂盒
一、试剂盒核心参数
检测范围:0.313-20 ng/mL(血清/血浆样本需稀释至线性区间)
灵敏度:检出限0.188 ng/mL(信噪比≥3)
特异性:与大鼠IKKβ高度结合,与IKKα等类似物交叉反应率<5%
样本类型:血清、血浆、细胞裂解液或组织匀浆(需离心去除颗粒物)
二、实验操作流程
1. 试剂准备
将试剂盒从4℃冰箱取出,平衡至室温(20-25℃)
未使用板条需立即放回含干燥剂的铝箔袋密封保存
2. 加样与孵育
标准品梯度稀释:用PBS按1:2比例稀释,制备7个浓度梯度(浓度20 ng/mL)
样本处理:血清/血浆样本建议稀释5-10倍,避免基质效应干扰
孵育条件:每孔加100μL标准品或样本,37℃避光孵育90分钟
3. 洗板与抗体反应
洗涤程序:洗板液洗涤5次,每次30秒,拍干后立即进行下一步
生物素化抗体:每孔加100μL工作液(按说明书1:100稀释),37℃孵育60分钟
酶结合物:孵育30分钟后终止反应,避光保存待测
4. 显色与终止
每孔加100μL TMB底物液,室温避光孵育15-20分钟
加入50μL终止液(2M H₂SO₄),立即测定450nm吸光度
三、关键注意事项
温度控制:全程保持37℃恒温,避免温度波动影响结合效率
移液精度:使用校准后的移液器,加样误差需<5%
交叉污染:更换枪头避免孔间污染,尤其高浓度样本
数据有效性:标准曲线R²应≥0.98,样本OD值需落在曲线中间段
四、结果计算
使用四参数逻辑拟合(4PL)或线性回归计算样本浓度
重复样本CV值应<15%(建议设置双复孔)
注:以上资料仅供参考,具体产品信息请咨询技术老师或品牌供应商。
大鼠(IKK)ELISA试剂盒实验使用说明书 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标,本生,您信任的合作伙伴!本生试剂盒
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