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暗视野显微镜是光学显微镜的一种,也叫超显微镜。暗视野显微镜的聚光镜ZY有挡光片,使照明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。
1、有足够的照明,标本不可见
暗视野显微镜灯电压可以被设置得太低,或灯泡可能没有足够的强度照射试样。将电压升高到大约12伏或更换光源。如果不解决这个问题,检查暗视野显微镜的聚光器,以确保它正确的位置用适当大小的视场光阑。此外,还要检查颜色和中性密度滤光片,偏光板,相位差板,或其他可能会降低光照强度的光路。
2、视场的ZX降低光照强度,有一个暗点
可能是暗视野显微镜台下聚光器位置不正确或暗视野显微镜的物镜是错误的大小。将暗视野显微镜物镜向上和向下,同时在视场中观察试样。检查做出一定的物镜孔径和视场光阑设置敞开位置。如果这并不影响照明,改变视场光阑尺寸使其稍大或稍小,然后重新检查照明。
偶尔出现此问题可能是,使用过厚(大于标准一毫米)载玻片。如果载玻片太厚,要么改变到正确厚度的载玻片或检查物镜,以确定它是否可以调整,以补偿不同厚度的载玻片。
3、灯泡内部有涂层的黑色蒸发的钨烧结
在过高的电压长时间工作,这肯定会影响其寿命的灯泡已使用。更换暗视野显微镜灯泡,在灯电压降低后观察试样的显微摄影。
4、图像具有明视野周边带
这由于暗视野显微镜台下聚光器错误地居中或视场光阑太小了。恢复到明视场,并重新建立科勒照明条件,再重复暗场的过程,确保聚光器的ZX。如果这没有作用,则增加视场光阑的大小,直到适当的暗场条件成立。
当暗视野显微镜的暗场聚光镜具有太高的数值孔径,也可能出现这个问题。如果是在目标内部的可变光阑,降低光圈孔径的大小,以确定是否太多的斜光进入物镜镜头前面。此外,它可能有助于增加视场光阑的大小。
5、外围视场只有一侧是光明的
检查物镜转换器,以确保物镜正确地定位在暗视野显微镜的光轴上。如果视场光阑不能正确居中,问题也可能发生。卸下目镜,然后使用定心螺丝正确对齐视场光阑。
6、试样图像不清晰
暗视野显微镜标本可能不适合。许多染色标本没有足够的散射光,暗场条件下能清楚成像。试样的厚度也可能是一个问题,因为非常薄的样品往往不成像。
7、具有明亮区域,妨碍观看暗场标本
这可能是由于灰尘,头发,纤维,或聚光镜上方某处的污染。彻底清洁试样,可以使用光学级纸巾或棉球。有时候,这个问题的产生是由于在物镜前透镜的污染。小心松开物镜,慢慢转动,同时通过目镜观察样品。如果阻塞一起旋转的目标,那么它可能是由于前透镜上的灰尘。取出的目标和滋润镜头前轻轻呼气,然后再用镜头纸或棉签包裹的长木杆。更换的目标并检查。
8、背景不是完全黑暗
卸下暗视野显微镜目镜,查看后焦面的光路中样本的情况。整个背部焦平面应该是黑暗,没有任何出现的四周边缘,明亮的光线。如果在物镜的后焦平面上观察到的光的弧或圆,则改变到一个稍大的视场光阑。此外,降低视场光阑的大小,将有助于YZ眩光和乌黑背景。
9、颜色显示在背景中
关闭视场光阑以及旋转试样,找到Z好的方向,然后确定问题是否已得到纠正。试样可以被重新安装在较薄的装置或安装介质,可能需要进行过滤。用柔软的镜头纸或棉签清洁暗视野显微镜的载玻片和盖玻片。
10、通过10x物镜观看试样的视场的ZX有一个长圆形的光点
暗视野显微镜聚光镜可能被错误地聚焦或扩散,过滤器可能丢失,导致图像出现在视场的ZX有一个长圆形的光点。重新聚焦,并在光路中扩散滤波。
11、视场有亮点,标本不能实现清晰对焦
可能有小气泡被困在聚光镜的顶部和底部的显微镜载玻片之间的油里。取出目镜,观察后焦平面上的物镜,其中的气泡将是可见的。为了弥补,断油接触,并用棉签除去残留的气泡。清洁聚光镜的前镜头与暗视野显微镜玻片上多余的油,然后换一个干净的滴油的镜头。如果问题仍然存在,彻底清洁所有的光学表面,然后再重新滴油。
12、在高放大倍率,胶体粒子显示不完全的牛顿环
聚光镜可能是偏离ZX。切换到低功耗的物镜和ZX聚光镜,仔细检查,以确定更高的功率物镜是否具有不同的ZX,若有,校准暗视野显微镜光轴ZX的物镜。
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