ELISA中常见问题及解决方法

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• ELISA中常见问题及解决方法

  下面分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：1.选择试剂选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。2.加样可能原因：1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长（特别是室内温度较高时）；3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。更多资料请下载文件小鼠elisa试剂盒[详细]

  2018-10-08 10:01

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• ELISA实验中常见问题及解决方法

  ELISA中常见问题及解决方法ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。我公司将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给同行带来一些启发，提高试验质量。下面分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法1选择试剂选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。2加样可能原因：a.血清或血浆标本分离不好即进行加样；b.手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长（特别是室内温度较高时）；c.加完标本再加酶试剂时酶液溅出孔外。解决办法：a.标本为血清：**将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10T，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。b.加样后及时放入孵箱。c.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。d.如果采用AT或其他全自动加样，**选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。e.标本较多时，请分批操作。3孵育可能原因：a.孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底；b.孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。解决办法：a.贴封片或加盖；b.按说明步骤严格控制操作时间。4洗板可能原因：a.采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。b.采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不彻底；洗板针堵塞，抽吸不完全；洗板不畅，导致洗板效果差。c.反应板过多造成洗板等待时间长。解决办法：a.保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后**在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；b.合理安排，或多用几台洗板机。5显色可能原因：a.显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；b.加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：a.显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用；b.加样时保持显色剂不外流；c.A、B液应避免接触金属器械。6终止可能原因：如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。7读板如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸;尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。[详细]

  2018-09-02 10:00

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• 日常使用中纯水机常见问题及解决方法

  日常使用中纯水机常见问题及解决方法[详细]

  2024-09-20 22:50

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• 双层玻璃反应釜常见问题及解决方法

  双层玻璃反应釜常见问题及解决方法[详细]

  2014-08-28 00:00

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• ELISA操作常见问题及其解决方法

  ELISA操作常见问题ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。下面就一些常见ELISA操作过程中的问题一一分析。1．样品稀释酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应，如果血清不稀释，不可避免会产生很强的非特异性反应，出现假阳性。因此，国外检测血清抗体的试剂盒，均规定将血清稀释至适当的倍数，以降低非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定，以保证试验的灵敏度和特异性。但是，有些用户未能严格按使用说明书操作，如某些产品应取10μl样品进行稀释，个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释，由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够，因此造成样品稀释倍数不准确，检测结果出现问题。2．试剂盒平衡试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温（约25℃），一般需在室温放置20～30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够，样品孵育时间相对缩短，ELISA反应不够充分。冬季室温低，可将试剂盒置37℃温箱20分钟。3．样品和试剂的混匀稀释前、后的样品必须充分混匀，所有试剂在加样前也须摇匀，以保证试验的均一性。4．加样在现在的ELISA商品试剂盒中，必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。5．温育温育是ELISA测定中影响测定成败Z为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。Z为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改变说明书操作，使用自己喜欢的温育时间和温育温度，这样造成一些不必要的麻烦。因为，不同试剂盒有不同的温育时间和温育温度的选择，随意更改温育时间或者温育温度将导致试验结果出现偏差。6．洗板固相免疫测定技术是一种非均相免疫测定技术，需以洗涤操作将特异结合于固相的抗原或抗体与反应温育过程中吸附的非特异成份分离开来，以保证ELISA测定的特异性。洗板对于ELISA测定来说，也是极其关键的一步。洗液尽量不要溢出孔外；加洗液后要静置1分钟，甩去板孔中洗液后，一定要大力拍干；及时更换吸水纸，尤其是拍过酶标记物的吸水纸一定要弃去，否则可能影响试验结果。更多ELISA操作常见问题及其解决方法请见附件......[详细]

  2024-09-30 14:23

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• 水质中总氮分析常见问题及解决方法

  水质中总氮分析常见问题及解决方法[详细]

  2024-09-11 17:47

  应用文章

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• 离子色谱仪常见问题之原因及解决方法

  离子色谱仪常见问题之原因及解决方法[详细]

  2014-02-21 00:00

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• 电热真空干燥箱常见问题及解决方法

  电热真空干燥箱常见问题及解决方法[详细]

  2011-10-13 00:00

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• 事半功倍--渗透压仪的常见问题及解决方法

  渗透压摩尔浓度的测定，广泛应用于制药、药物分析和临床用药的渗透压摩尔浓度测定；在医疗诊治、急救中用于测量体液的渗透压摩尔浓度；也可广泛应用于生物、植物、环保、卫生制品、食品饮料等领域的水溶液渗透压摩尔浓度测定及科学研究等。[详细]

  2024-09-12 13:25

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• 事半功倍--渗透压仪的常见问题及解决方法

  事半功倍--渗透压仪的常见问题及解决方法[详细]

  2024-09-12 13:21

  应用文章

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• Agilent GC使用过程中常见问题及解决方法

  Agilent GC使用过程中常见问题及解决方法[详细]

  2008-12-20 00:00

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• 电站常见问题解决方法

  电站常见问题解决方法[详细]

  2024-09-15 08:36

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• BS33扩散式气体检测仪常见问题及解决方法

  BS33扩散式气体检测仪常见问题及解决方法BS33扩散式气体检测仪是我公司向您推荐的一款携带方便，非常实用的气体检测仪，仪器具有非常清晰的大液晶背光显示屏，声光报警及震动提示，适用于防爆及有毒气泄漏、地下管道或矿井等场所，能Zda限度的保证工作人员的生命安全不受侵害，生产设备不受损失。由于技术水平有限，我们在研制的过程中难免会出现纰漏，如出现问题请参照如下表格解决：问题可能的原因解决方法检测仪不能开启电池电量耗尽检测仪故障检测仪充电请联系我们或当地代理/服务商无气体时有读数零点漂移检测仪故障重新零点标定请联系我们或当地代理/服务商检测仪不能准确测量气体检测仪需要灵敏度核准传感器被遮挡重新灵敏度标定清洁传感器检测仪不能进入报警状态声光报警功能关闭报警设置值不正确检测仪故障打开声光报警功能重新设置报警值请联系我们或当地代理/服务商未达到报警浓度，每隔一段时间会报警一次置信嘟声功能被打开不需要此功能可关闭当前浓度值正确，仪器却一报警仪器之前一直处于一定浓度的气体中，现在仍然处于平均值报阶段开闭仪器，重新开机。（相当删除历史数据，降低均值）问题仍然无法解决请认真阅读备份与恢复章节，将仪器恢复为出厂状态如上述表格仍未解决您的问题，请联系当地经销商或者拨打我公司的客服电话，您的意见就是我们前进的Zda动力。[详细]

  2018-10-07 10:02

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• TVOC检测仪PID传感器常见问题及解决方法

  TVOC检测仪PID传感器常见问题及解决方法[详细]

  2024-09-30 06:39

  应用文章

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• 温度试验箱常见问题解决方法

  温度试验箱常见问题解决方法[详细]

  2010-03-04 00:00

  应用文章

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• 移液器常见问题和解决方法

  移液器常见问题和解决方法[详细]

  2013-12-10 00:00

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• 电子汽车衡常见问题解决方法

  电子汽车衡这款产品是我们现在Z常见的一款产品了，我们上海恒刚仪器仪表有限公司专业生产销售电子汽车衡，我司的电子汽车衡现在已经销往全国各地了哦，大家也就能想到我司的这款电子汽车衡有多受欢迎了吧，有感兴趣的朋友欢迎大家前来我司咨询！今天，小编就来给大家说说关于电子汽车衡的一些相关知识，电子汽车衡使用时间久了可能就会出现一些问题，那大家在面对电子汽车衡出现问题时**不要惊慌，首先要知道出现问题的原因，那样我们才能对症下药。下面，小编就来给大家说说关于电子汽车衡常见的问题以及解决方法吧，希望大家能够认真阅读，相信大家读完本文后一定会有所收获的。想了解电子汽车衡常见的问题以及解决方法详细信息请点击，文件纯属于免费下载，大家可以放心使用！感谢您的大力支持！本文由上海恒刚仪器仪表有限公司整理提供。[详细]

  2018-10-11 10:00

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• 金相显微镜常见问题的解决方法

  金相显微镜常见问题的解决方法[详细]

  2024-09-16 12:39

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• 弹出式烘箱常见问题解决方法

  1. 弹出式烘箱样品加热到时间后后，打开抽屉找不到样品了 这是因为样品尺寸过大，样品不平整或者放置样品的时候太靠近抽屉的外部，导致抽屉底板打开后，样品未落入下料口，直接卡在风道内了。这时候就需停止加热，关闭设备。打开仪器后部维护门，拆开风道固定螺丝，移出风道仓，取出掉入的样品。防止样品堆积导致抽屉打不来，温度探头损坏等故障。 2. 弹出式烘箱样品抽屉推进去，加热指示灯不亮，必须手按压着才工作 烘箱的抽屉左右各有一个定位销，如果定位销位置太短，就会导致抽屉无法固定，手松开没法定位，这时需要手动调节定位销的位置，使得抽屉正好固定且缝隙不大不漏风。另外抽屉里面还有一个到位接触开关，如抽屉关紧后，烘箱还不工作加热那就需要调节里面的接触开关，请联系我们的售后工程师。 3. 样板每次卡在底板抽屉中漏不下来 这是因为托盘打开的幅度过小，没法把样品落下来，需要调节托盘运动气缸的打开幅度接触开关，具体方法请联系我们的售后工程师。 4. 每次样品落掉后，抽屉的底板无法还原成闭合状态，需抽开手动推上去 这是因为托盘闭合的幅度过小，没法把托盘顶到位，需要调节托盘运动气缸的闭合幅度接触开关，具体方法请联系我们的[详细]

  2024-09-16 05:41

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• 细胞培养常见问题及其解决方法

  细胞培养常见问题及其解决1.如何选用特殊细胞系培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。2.何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。3.可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活。4可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。5何谓FBS,FCS,CS,HS?FBS（fetalbovineserum）和FCS（fetalcalfserum）是相同的意思，两者都是指胎牛血清，FCS乃错误的使用字眼，请不要再使用。CS（calfserum）则是指小牛血清。HS（horseserum）则是指马血清。6培养细胞时应使用5%或10%CO2？或根本没有影响？一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10%CO2；当培养基中NaHCO3为每公升1.5g时，则应使用5%CO2培养细胞。7.Hank's平衡盐溶液（HBS）要在空气中使用，不需要CO2培养箱。原因是什么？Hank's平衡盐溶液（HBS）和Earle's平衡盐溶液（EBS）有什么本质的功能差别？HBS和EBS的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Eagles（2.2g/L）中比在Hanks（0.35g/L）中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡，以维持溶液的PH值。Eagles液在空气水平的CO2中，溶液会变碱，Hanks液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织，需要用Eagles液，。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织，用Hanks液就可以了。8.细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因。更多常见问题及解决方法请见附件.........[详细]

  2024-09-29 22:57

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