特色方案｜动物性食品中氟苯尼考及氟苯尼考胺的测定

动物性食品中氟苯尼考及氟苯尼考胺的测定

目前，人们对动物源性食品的需求日益增加，养殖场为预防或治 疗畜禽疾病的过程中会借助多种兽药。氟苯尼考是广谱抗 菌素，对革兰氏阳性菌和阴性菌均有较好的抑 制效果。然而，超量使用兽药不仅会危害公众的健康，而且也会对环境造成污染。因此，一方面，我们要严格控制兽药的使用，另一方面，我们要对动物源性食品中的兽药残留进行检测监测，守护食品安全。本方法适用于动物性食品中氟苯尼考及氟苯尼考胺的测定中的前处理步骤。

1、提取

（1）称取2g样品，加入100 μL氘代氯霉素工作液（100 ng/mL，甲醇），涡动混匀30 s，静置15 min；

（2）加入10 mL乙酸乙酯-氨水溶液*，涡旋混合1 min，于6000 r/min离心2 min，取全部上清液于100 mL鸡心瓶中；残渣重复提取2次，合并3次提取液；

（3）向鸡心瓶中加入2 mL 5%乙酸水溶液**，涡旋混合1 min，于40℃水浴中减压旋蒸浓缩至1.5 mL；

（4）将浓缩液转至15 mL离心管中，用2 mL 5%乙酸水溶液洗涤鸡心瓶，将洗涤液合并至同一离心管中；

（4）继续向步骤（4）的离心管中加5 mL正己烷，涡旋混合1 min，于6000r/min离心2 min，弃上层；对下层提取液重复脱脂一次（加5 mL正己烷，涡旋混合1 min，于6000r/min离心2 min，弃上层），待净化。

*乙酸乙酯-氨水溶液：取乙酸乙酯98 mL，加氨水2 mL，混匀；

**5%乙酸水溶液：取乙酸5 mL，用水溶解并稀释至100 mL。

2、净化

SHIMSEN Styra MCX，

60 mg / 3 mL

货号：380-00853-01

（1）活化：依次向小柱中加入2 mL甲醇、2 mL水，弃去流出液；

（2）上样：向小柱中加入待净化液，弃去流出液；

（3）清洗：依次向小柱中加入2 mL 5%乙酸水溶液、2 mL水，弃去流出液，于负压装置（货号：RT-26077）中将小柱抽干；

（4）洗脱：向小柱中加入5 mL 10%氨水甲醇溶液洗脱，收集流出液；

（5）重新溶解：将流出液于40℃水浴下氮吹至近干，用30%乙腈水溶液定容至0.5 mL，涡旋混匀，经针式滤器（货号：380-00321）过滤，待检测。

附：参考方法

一、分析条件

1、色谱条件

色谱柱：Shim-pack GIST C18-AQ HP，1.9 μm，100 × 2.1 mm（货号：227-30807-02）

流  速：0.4 mL/min

进样量：3 μL

柱  温：40 ℃

流动相：A：水，B：乙腈

梯度洗脱，洗脱程序如下表

2、质谱条件

离子化模式：ESI，正负离子同时扫描

扫描模式：多反应监测 (MRM)

DL管温度：250℃

离子源接口电压：4.0 kV

加热模块温度：400℃

接口温度：300℃

雾化气：氮气 3.0 L/min

干燥气：氮气 10.0 L/min

加热气：空气 10.0 L/min

碰撞气：氩气 (230 kPa)

驻留时间：93 ms

MRM参数如下表

二、实验结果

1、标准品MRM色谱图（5 ng/mL）

2. 氟苯尼考及氟苯尼考胺的添加回收结果（10 ng/g）