一文带你了解分子生物学研究技术：聚合酶链式反应（PCR）
1、什么是PCR
PCR是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）的简称，其是一种用于放大扩增特定的DNA（或RNA）片段的分子生物学技术。这种技术模拟体内DNA的天然复制过程，能将微量的DNA进行特异性的扩增，在短时间内获得足够的DNA，是分子生物学研究中不可缺少的一员。
2、标准PCR的过程
此项技术是模拟DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物，在整个PCR过程中包含了变性——退火（复性）——延伸三个基本反应步骤。
DNA变性（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA。
退火（复性）（40℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。
延伸（68℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右Z佳的活性）的作用下，以dNTP为原料，从引物的5′端→3′ 端延伸，合成与模板互补的DNA链。
每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量既增加一倍。
3、为什么要使用梯度PCR仪呢
梯度PCR仪是指一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件的仪器，因为不同的DNA片段其Z适退火温度不同，采用梯度PCR仪通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的Z适退火温度，优化反应条件，进行有效的扩增。
在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火，同时还要足够高，以减少非特异性结合。
使用普通的PCR仪进行扩增时，只能运行一个特定的退火温度，当目的基因的退火温度不适时，就可能出现假阳性，影响实验结果。而对于梯度PCR仪，不但可以作为普通PCR仪使用，也可以通过设置不同的温度梯度（通常为12个梯度温度），研究未知DNA退火温度的扩增，有效降低或避免假阳性，同时在不理想的工作条件下扩增出产物，既节约成本也提高了实验效率。
适用于分子生物学、微生物学、遗传学、细胞生物学、食品科学和农学等领域，进行分子克隆、基因表达分析、基因型鉴定、测序、病原微生物分析等实验研究。
识别下方二维码 即可申请免费试 用
全部评论(0条)
推荐阅读
-
- 一文带你了解干细胞培养全流程
- 干细胞研究已成为重要的方向，接下来小翌将带你了解干细胞的整个培养流程，避免踩坑。
-
-
- 恒温恒湿试验箱优势何在？一文带你了解
- 恒温恒湿试验箱具有多方面优势。一是精准的温湿度控制，借助先进控制系统与高精度传感器，可精确维持设定的温湿度。
-
- 分享推介 | 一文带你快速了解微通道反应器
- 微通道反应器的定义： 微通道反应器是一种结构紧凑、传热效率高、控制精度高的反应器。
-
- 一文带你了解2024年上半年细胞治疗IND申报进展
- 更多相关内容，欢迎文末扫码下载产品资料
-
- 干货 ！一文带你了解泰林悬液式湿热灭菌生物指示剂
- 干货 ！一文带你了解泰林悬液式湿热灭菌生物指示剂
-
- 一文带你了解佳谱仪器镀层测厚仪对于晶圆检测的重要性
- 佳谱仪器T350镀层测厚仪为晶圆镀层质量检测提供了高效、可靠的解决方案，有力地保障了半导体制造过程中晶圆镀层的质量，进而推动整个半导体产业的高质量发展。
-
- 带你了解延迟体积
- 延迟体积是层析系统的物理特征参数，它指的是梯度输送控制装置与层析柱柱头之间的体积差，通常又称为“梯度延迟体积”。
-
- 带你初步了解“薄层色谱仪”
- 相信大家夏天都有被蚊虫叮咬过吧？大家有没有听说过关于蚊子的一种疾病-疟疾。疟疾，是一类主要由蚊虫叮咬传播的寄生虫病，目前我国疟疾病例都来自境外输入，主要输入来源地是非洲和东南亚。有关注过热带疟疾的小伙
-
- 快上车，带你一起了解马弗炉！
- 快上车，带你一起了解马弗炉！
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布，观点仅代表作者本人，不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们立即通知作者，并马上删除。
②凡本网注明"来源：仪器网"的所有作品，版权均属于仪器网，转载时须经本网同意，并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱：hezou_yiqi
最新话题
最新资讯
- 美天旎Miltenyi自动化细胞分选磁力架进口平替碳环智造自动细胞分离仪
- 核酸提取环节浓缩DNA/RNA用哪种真空离心浓缩仪好？
- 自动化细胞分选磁力架销冠碳环智造MX1-A自动细胞分离仪细胞分选器
- 适配美天旎miltenyiMS柱细胞分选磁力架哪个好
- 适配美天旎miltenyiLS柱LD柱全血柱细胞分选磁力架哪个好
- 有柱细胞分选和无柱细胞分选用哪种细胞分选磁力架好？
- 原生质体或者做菌液侵染的时候会用到哪种真空离心浓缩仪？
- permagen磁力架进口平替碳环智造96孔磁力架自动化仪器磁力架
- permagen磁力架进口平替碳环智造96孔磁力架自动化仪器磁力架
- Agilent 34970A 数据采集器 供应
作者榜
北京宏睿达科技有限公司
沪公网安备 31011502008050号
参与评论
登录后参与评论