合规赋能 | VC双三元液相轻松实现药典正相二维VD测定

赛默飞特色双三元液相

赛默飞双三元液相早在2006年就已在市场推出，一经推出便得到行业内一致好评，并获得当年匹兹堡金奖。其采用独特的双泵设计，每一个泵都可以独立工作，有各自独立的流动相比例阀和流动相进出系统，可以同时单独控制三种不同的流动相来进行复杂的样品分析。柱温箱部分放置的两个切换阀可以通过变色龙软件的控制在相应的时间进行阀切换，实现流动相流路和色谱柱连接的不同组合切换。因此使用双三元液相可以轻松实现2020版《中国药典》维生素D测定第四法。

VC双三元液相色谱条件

Vanquish? Core（简称VC）双三元液相采用模块化设计，耐压达700bar，可以兼顾常规液相及部分超高效液相工作。结合配套的正相套件，即可实现正相体系的使用。本实验详细条件如表1所示。

表1.  双三元二维液相色谱条件

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实验结果

维生素D3校正因子f1对照品溶液和校正因子f2混合对照品溶液及供试品配置步骤参考药典通则0722 维生素D测定法，实验结果如下：

图2.f2混合对照品溶液一维色谱图（上）和二维色谱图（下）（点击查看大图）

表2.  f2混合对照品溶液一维色谱结果

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由图2及表2可见，采用双三元液相色谱测定维生素D，前维生素D和维生素D的分离度良好，可已达到9.3，满足药典分离度大于5的要求；两个峰的理论塔板数分别为9568及8798，均远大于药典要求的2300。

图3. 某维生素D滴剂供试品一维色谱图（上）和二维色谱图（下）（点击查看大图）

图3显示该维生素D滴剂供试品一维色谱中，前维生素D 受基质干扰，与干扰峰分离度不佳，维生素D的峰形较宽。经过二维色谱后，前维生素D与干扰峰达到分离，两个目标峰的峰形收窄，更利于维生素D的定量。

图4. f2混合对照品溶液连续进样5针叠加图（上图为一维，下图为二维）（点击查看大图）

实验对方法的重复性做了考察，结果显示连续进样5针，一维前维生素D及维生素D的保留时间RSD分别为0.88%及0.42%，峰面积RSD分别为1.42%及0.96%；二维前维生素D及维生素D的保留时间RSD分别为0.88%及0.42%，峰面积RSD分别为1.21%及0.80%，充分体现了双三元液相两泵的优良性能及整个液相系统的稳定性。