国标解读：HJ 505-2009水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定 稀释与接种法

在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。五日生化需氧量（BOD5）通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在(20±1)℃的暗处培养5d±4h，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量。

地表水、工业废水和生活污水

1. 非稀释法：BOD5不大于6mg/L，样品中有足够微生物。

2. 非稀释接种法：BOD5不大于6mg/L，样品中无足够微生物。

3. 稀释法：BOD5大于6mg/L，样品中有足够微生物。

4. 稀释接种法：BOD5大于6mg/L，样品中无足够微生物。

1. 质控样品

（可进入官网或小程序进行查看）

2. 接种液

可购买接种微生物用的接种物质或选择未受工业废水污染的生活污水、含有城镇污水的河水或湖水、污水处理厂的出水。

3. 盐溶液

磷酸盐缓冲溶液，硫酸镁溶液，氯化钙溶液，氯化铁溶液

4. 葡萄糖-谷氨酸标准溶液

将葡萄糖（C6H12O6，优级纯）和谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH，优级纯），在130℃干燥1h，各称取150mg溶于1000mL水中，此溶液的BOD5为(210±20)mg/L，现用现配。

5. 稀释水

在5~20L的玻璃瓶中加入一定量的水，控制水温在(20±1)℃，曝气使稀释水中的溶解氧达到8mg/L以上。使用前每升水中加入上述四种盐溶液各1.0mL，混匀，20℃保存。

6. 接种稀释水

每升稀释水中加入适量接种液，接种稀释水pH值为7.2，空白试样测定BOD5应小于1.5 mg/L。

接种稀释水带标试样测定：取20 mL葡萄糖-谷氨酸标准溶液于稀释容器中，用接种稀释水稀释至1000mL，BOD5测定结果应在180~230mg/L范围内。

7. 稀释倍数的确定

按照有证标物给定的样品浓度范围和HJ 505-2009要求，样品稀释的程度应使消耗的溶解氧质量浓度不小于2mg/L，培养后样品中剩余溶解氧质量浓度不小于2 mg/L，且试样中剩余的溶解氧的质量浓度为开始浓度的 1/3~2/3为最佳。当不能准确地选择稀释倍数时，一个样品做2~3个不同的稀释倍数。

稀释倍数的确定可先根据总有机碳（TOC）、高锰酸盐指数（IMn）或化学需氧量（CODCr）的值及其与BOD5的比值（表一）估计BOD5的期望值，然后按表二确定稀释倍数。

表一

（来源：HJ 505-2009）

表二

（来源：HJ 505-2009）

8. 测定结果

（来源：HJ 505-2009）

结果报告中应注明：样品是否经过过滤、冷冻或均质化处理。

1. 温度

水温和溶解氧成反比，水温低时溶解氧高，水温高时溶解氧低^[1]。测定时，必须严格控制样品温度为(20±1)℃，以确保试验的准确性。

2. pH值

pH值对微生物的活性有较大影响，过高或过低都会影响分析结果，样品pH值应在6~8范围内，最佳为7.2^[2]。

3. 稀释倍数

稀释倍数偏小，样品的测定结果容易偏低，稀释倍数过大，结果容易偏高^[3]。

4. 硝化抑制剂

若试样中含有硝化细菌，有可能发生硝化反应，需在每升试样中加入2 ml丙烯基硫脲硝化抑制剂。

5. 余氯和结合氯

污水处理厂的出水中含余氯和结合氯，其会抑制微生物活性，使BOD5的测定结果偏低，可加入过硫酸钠消除余氯和结合氯的影响[3]。

参考文献：

[1] 张丽. 稀释与接种法测定五日生化需氧量的影响因素分析[J]. 山西化工, 2023, 43 (11):65-67.

[2] 陈美莹. 稀释与接种法测定五日生化需氧量的影响因素[J]. 山西化工, 2025, 45 (05):110-112.

[3] 朱智慧, 徐锡梅, 章文华, 等. 稀释接种法测定五日生化需氧量的影响因素[J]. 净水技术, 2022, 41(6):170-174, 186.