GB 5009.150-2016 | 腐乳中3种红曲色素的检测

色谱柱：Silversil C18，4.6mm×250mm，5μm(Cat.#:99202)

流速：1.0mL/min

柱温：40℃

进样量：20μL

流动相：A为甲醇，流动相B为乙酸-乙酸铵溶液（pH 5.0），梯度洗脱，洗脱程序见表1

检测波长：红曲红胺264nm，红曲素和红曲红素390nm

运行时间：40min

标准色谱图见图1

图1  红曲红胺、红曲素和红曲红素标准色谱图

1、有关文献记载的关于食品中红曲色素的前处理条件有多种，如甲醇-乙酸乙酯提取结合凝胶渗透色谱（GPC）净化、乙醇-水提取结合固相萃取柱（SPE）净化、乙腈-水直接提取等。红曲红胺、红曲素和红曲红素均为醇溶性色素，试验发现采用SPE小柱净化上柱时，如果待上柱液中有机溶剂比例较低，则红曲色素无法完全溶解，如果有机溶剂比例较高时，则不易被SPE小柱保留，同时腐乳中脂肪含量较少，蛋白质又难溶于乙醇，因此选择通过乙醇提取并离心的手段进行前处理。试验选取80%乙醇水溶液和无水乙醇对同一样品进行提取比较，结果发现采用无水乙醇进行提取含量更高。