以下是关于大鼠肝微粒体混合功能氧化酶(MFO)ELISA试剂盒实验使用说明书的综合信息整理:
BS-3491 大鼠肝微粒体混合功能氧化酶(MFO)ELISA试剂盒
一、试剂盒基本参数
检测原理:双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),在450nm波长下测定吸光度值
规格:48T/96T(可拆卸孔板)
保存条件:2-8℃冷藏,有效期6个月
样本类型:血清、血浆、组织匀浆、细胞上清液等
二、实验前准备
器材准备:
96孔酶标仪、自动洗板机
移液器及一次性枪头(建议使用排枪)
Eppendorf管及干净塑料容器
试剂处理:
使用前将所有试剂平衡至室温
标准品需现配现用,稀释后不可保存
底物B需避光保存,避免金属接触
三、实验步骤
加样顺序:
按说明书要求依次加入标准品/样本→生物素标记抗体→HRP标记亲和素
每步骤需严格控制温育时间和温度
洗涤操作:
使用20×洗涤液配制工作液,洗板后需充分拍干
避免吸水纸直接接触反应孔
显色与终止:
底物TMB显色10-15分钟,显色后立即终止
终止液为酸性溶液,需避免皮肤接触
四、注意事项
安全防护:
操作时需穿戴实验服及手套,避免接触终止液/底物
禁止用嘴吸取任何试剂
质量控制:
板内变异系数<10%,板间变异系数<15%
回收率需达到85%-115%
五、数据计算
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线
样本浓度需高于空白对照OD均值+2SD才具统计学意义
(注:完整说明书应包含具体浓度梯度、温育时间等参数,建议以实际试剂盒配套说明书为准)
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