【概述】真菌毒素是由真菌在适宜环境条件下产生的一系列有毒次生代谢产物，膳食是人体摄入真菌毒素的主要方式。

食品中检出率较高的真菌毒素主要由曲霉菌属（Aspergillus）、青霉菌属（Penicillium）以及镰刀菌属（Fusarium）等菌属产生，包括黄曲霉毒素（Aflatoxin）、赭曲霉毒素A(Ochratoxin A）、杂色曲霉素（Sterigmatocystin）、展青霉素（Patulin）、伏马菌素（Fumonisin）、玉米赤霉烯酮（Zearalenone）、呕吐毒素（Deoxynivalenol）、雪腐镰刀菌烯醇（NIV）、T-2毒素等。

【实验/设备条件】

仪器设备：UPLC-MS/MS

Thermo Scientific TSQ Endura

色谱柱：Commasil® BEH T-C18 

2.1 mm×100 mm,3 μm

流动相： A：5mM乙酸铵（0.1%甲酸）溶液     B：乙腈（0.1%甲酸）溶液

流动相梯度：初始90%A，40%A（0 min~2 min），10%A（2 min~6 min），

10%A（6min~7min），90%A（7min~8min），90%A（8min~10min）

流速：0.3 mL/min      

柱温：室温          

进样体积：5.0 mL

【质谱条件】

鞘气压力：30 arb         辅气压力：8 arb

离子传输管：300 ℃      辅气温度：350 ℃

检测方式：多离子反应检测（MRM）

扫描方式：正离子模式（ESI+）和负离子模式（ESI- ）

【样品提取】

称取 5 g试样于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈-水-乙酸溶液（80:19:1），涡旋混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20 min，在6000 r/min下离心10 min，取上清液备用。

【实验/操作方法】

1）向玻璃试管中加入10 mL样品提取液。

2）将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中，并向下压净化柱至试管底端。

3）将净化柱上部净化后的样品提取液取出至样品瓶或EP管中。

4）取5 mL净化提取液，40℃条件下氮气吹至近干，加入乙腈-水（50:50）溶液定容至1 mL，涡旋 30s 溶解残渣，过微孔滤膜，上机分析。

【实验结果/结论】

从表2中可知，使用Copure® 302多功能净化柱处理后，得到10种多毒素（黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2，玉米赤霉烯酮，呕吐毒素，T-2毒素，赭曲霉毒素，伏马毒素B1、B2）的回收率均在90-110%之间，RSD小于10 %，整体回收率评价优于国内A品牌。

从图1可知，使用Copure® 302多功能净化柱净化处理样品提取液后，上机液中的杂质干扰减少，目标物信号响应值提高，整体净化效果评价优于国内A品牌，能够满足实验使用需求。

【仪器/耗材清单】