鱼肉中甲砜霉素检测的固相萃取方法（Copure® C18）

一、样品提取 

取均质后鱼肉 5.00 g（精确到 0.01 g）到 50 mL离心管，加 6.0  g 无水硫酸钠，再加 10 mL 乙腈，超声 5 min，振荡 5 min， 4000 r/min 离心 5 min 取上清液 8 mL 到 15 mL 离心管，氮气 吹干；加 5 mL 水溶解，再加 5 mL 正己烷除脂，涡旋混匀， 4000 r/min 离心 3 min，上层有机相弃去，分层处正己烷用氮 气吹干，下层待净化。 

二、SPE 柱净化（Copure® C18，500 mg/6 mL） 

活化：C18 固相萃取柱依次加 5 mL 甲醇，5 mL 水平衡。 

上样和洗脱：加入待净化溶液，弃去流出液；再加 10 mL 水 淋洗，弃去流出液，抽干小柱；加入 8 mL 甲醇洗脱，收集 流出液（上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min 以内）。 

重新溶解：洗脱液 40℃下氮气吹至近干，用 1 mL 20% 乙腈 水溶液溶解，经 0.22 µm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。 三、仪器条件

设备：Waters Alliance 2695 色谱柱：XB-C8 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器：Waters 2487 紫外检测器 检测波长：224 nm  流动相：A：乙腈   B：水 洗脱方式：等度洗脱，A: B=20: 80 流速：1.0 mL/min  进样体积：20 µL 

四、实验结果 

表 1 64.0 μg/kg 鱼肉中甲砜霉素的添加回收结果