普通PCR仪和荧光定量PCR仪的操作规程

聚合酶链式反应，简称PCR。聚合酶链式反应，其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，通过高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应形成一个周期，目的DNA迅速扩增，其具有节约时间，操作简单，高灵敏度，强特异性等特点。其又被叫做无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。其不但在核酸序列分析和基因分离、克隆被使用，其还在任何有DNA,RNA的地方被使用或者被用来对疾病进行诊断。

普通PCR仪操作规程

开机操作

（1）将PCR仪电源开关打开。

（2）将PCR仪顶盖向后平推，然后将PCR薄壁管放进去。

（3）将PCR仪顶盖向前平推，并且均匀用力压下反扣部分。

值得注意的是：9700PCR仪必须使用圆头的PCR薄壁管。

关机操作

（1）实验结束后，点击EXit到主界面出现，将PCR电源开关关闭。

（2）均匀用力抬起反扣部分，将PCR仪顶盖向后平推，将PCR薄壁管取出。

（3）将PCR仪顶盖向前平推。

荧光定量PCR仪操作规程

1.开始运行仪器

将PCR仪底座开关打开，再将定量PCR仪检测器开关打开。在实验之前，首先对系统预热半个小时，打开电脑，将iQ5软件启动。

2.放置样品

在0.2ml的薄壁管或96孔板内加入PCR反应体系，将管盖盖上，注意，不要让手指和反应管表面有接触，所以必须将一次性塑料手套戴上。按照顺序在仪器的加热孔中放入反应管。

3.设置程序，运行试验

定量PCR软件的基本操作步骤如下：

（1）对热循环程序文件进行设置。

（2）对反应管文件进行设置。

（3）点击“run”键，将程序运行。

（4）数据分析

4.结果分析

（1）PCR反应结束后，标准曲线和Ct值软件会自动计算。

（2）可以在软件窗口选择相应的分析功能进行表达量分析，等位基因分析。

（3）点击右上方的“Report”键，还能够将结果报告单输出。

5.关闭运行仪器

实验结束后将iQ5软件、荧光定量检测器及扩增系统电源关闭，将电脑关闭，将反应管取出。