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DNA分子具有互补碱基序列,能够通过碱基对使氢键等形成,从而使稳定的双链区形成为DNA分子杂交的基础。
杂交技术介绍
杂交是指互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对使稳定的杂合双链分子DNA分子形成的过程。杂交过程特异性非常的高,能够采用所使用的探针已知序列检测特异性的靶序列。待检测的核酸和所使用探针为杂交的双方,该检测对象既能够为细胞总DNA或总RNA,也能够为克隆化的基因组DNA。按照使用方法,待检测的核酸既能够在细胞内杂交也能够是提纯的。探针必须经过标记,为检测与示踪提供便利,同位素为Z常用的探针标记物,然而因为同位素可能发生泄漏,因此,这些年来,有许多非同位素标记探针的方法被发展出来。
核酸分子杂交的特异性和灵敏度均非常的高,所以其在遗传病的基因诊断、基因组中特定基因序列的检测、酶切图谱的制作和克隆基因的筛选等方面得到广泛地应用。其不但广泛应用于分子生物学领域,其在在临床诊断上的应用也越来越广泛。
类比分析
为了方便理解,打个比方,将宿主DNA(一般做克隆是有很多宿主DNA)看成很多还没装锁的“门”,将插入宿主DNA上(或替换掉一段序列)的目的基因看成一把特定的“锁”,而能开那把锁唯yi的“钥匙”就是这个基因探针。若某个“门”能够使用“钥匙”将其打开,则表示这个“门”已经有“锁”了。也就是若杂交信号可以被检测到,则表示在宿主DNA上已经存在目的基因。
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