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动物全血线粒体粗提分离试 剂盒产品说明书
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主要用途动物全血线粒体粗提分离试剂是一种旨在通过化学溶解以纯化血白细胞、物理或化学破膜及离心处理分离出完整而纯化的线粒体细胞器的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物血细胞中的线粒体的制备。其制备物产量高,可以被用于细胞凋亡、信号传递、能量代谢、蛋白组学和病理生理学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能稳定,分离产量和纯度堪称同类产品**。技术背景线粒体细胞器的研究是现代细胞生物学的Z重要的课题之一。线粒体成为生物衰老、古生物、细胞凋亡、肿瘤、HIV、老年痴呆症、糖尿病、肌肉疾病等研究的主要对象。从任何组织或细胞分离线粒体的技术方法基本上采用:**,通过机械或化学方法破裂细胞;第二,通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器;第三,通过高速差速离心获得线粒体;甚至,第四,可以通过等密度离心获得纯度更高的线粒体。
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动物全血线粒体粗提分离试 剂盒产品说明书
- 主要用途动物全血线粒体粗提分离试剂是一种旨在通过化学溶解以纯化血白细胞、物理或化学破膜及离心处理分离出完整而纯化的线粒体细胞器的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物血细胞中的线粒体的制备。其制备物产量高,可以被用于细胞凋亡、信号传递、能量代谢、蛋白组学和病理生理学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能稳定,分离产量和纯度堪称同类产品**。技术背景线粒体细胞器的研究是现代细胞生物学的Z重要的课题之一。线粒体成为生物衰老、古生物、细胞凋亡、肿瘤、HIV、老年痴呆症、糖尿病、肌肉疾病等研究的主要对象。从任何组织或细胞分离线粒体的技术方法基本上采用:**,通过机械或化学方法破裂细胞;第二,通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器;第三,通过高速差速离心获得线粒体;甚至,第四,可以通过等密度离心获得纯度更高的线粒体。[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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动物硬组织线粒体粗提分离试剂盒产品说明书(中文版)
- 主要用途动物硬组织线粒体粗提分离试剂是一种旨在从动物硬组织中分离出完整而纯化的线粒体细胞器的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。适合于各种动物硬组织(心脏或肌肉)的线粒体的制备。可以被用于细胞凋亡、信号传递、能量代谢、蛋白组学和病理生理学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能稳定,分离产量和纯度堪称同类产品**。技术背景线粒体细胞器的分离是现代细胞生物学研究的Z常用的手段之一。从任何组织或细胞分离线粒体的技术方法基本上采用:**,通过机械或化学方法破裂细胞;第二,通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器;第三,通过高速差速离心获得线粒体;甚至,第四,可以通过等密度离心获得纯度更高的线粒体。产品内容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升净化液(ReagentC)毫升强化液(ReagentD)毫升保存液(ReagentE)毫升酶解液(ReagentF)毫升产品说明书1份保存方式保存净化液(ReagentC)和酶解液(ReagentF)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,有效保证12月用户自备15毫升锥形离心管:用于线粒体初步制备操作的容器1.5毫升离心管:用于保存线粒体的容器4℃台式离心机:用于沉淀细胞4℃超速离心机:用于分离细胞器成分DOUNCE匀浆器:用于裂解细胞[详细]
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2018-11-18 10:00
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植物线粒体粗提分离试剂盒
- 主要用途植物线粒体粗提分离试剂是一种旨在从植物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体细胞器的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各种新鲜植物组织,包括叶片(leaf)、谷粒(grain)、种子(seed)、以及培养细胞的线粒体的制备。其制备物产量高,可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能稳定,分离产量和纯度堪称国际同类产品**。技术背景线粒体细胞器的分离是现代细胞生物学研究的Z常用的手段之一。从任何组织或细胞分离线粒体的技术方法基本上采用:**,通过机械或化学方法破裂细胞;第二,通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器;第三,通过高速差速离心获得线粒体;甚至,第四,可以通过等密度离心获得纯度更高的线粒体。[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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植物线粒体粗提分离试剂盒产品说明书(中文版)
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2015-01-14 00:00
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全血线粒体DNA萃取试剂盒产品说明书(中文版)
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2015-08-25 00:00
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2015-02-04 00:00
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2015-05-19 00:00
操作手册
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全血基因组DNA提取试剂盒说明书
- 全血基因组DNA提取试剂盒说明书货号:D1800规格:50T/100T保存:室温(15℃-25℃)干燥保存,复检期12个月,2℃-8℃保存时间更长。试剂盒内容:50T100TRNaseA1ml1ml×2蛋白酶K1ml1ml×2红细胞裂解液120ml120ml×2溶液A15ml25ml溶液B15ml30ml漂洗液15ml30ml洗脱液10ml20ml吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份产品简介:本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取全血基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,能够GX、专一吸附DNA,可Zda限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。操作步骤:使用前请先在漂洗液和溶液B中加入无水乙醇,加入休积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。1、样品的处理(本产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的0.lml-1ml血液样品):a、在血液样品中加入2-3倍体积的红细胞裂解液,充分颠倒混匀,12000rpm离心1min,小心吸去上清,沉淀应为白色或淡红色,如果裂解不彻底,可重复以上述步骤一次。向沉淀中加200ul溶液A,振荡至彻底混匀。b、如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量为5-20u1,不需要再用红细胞裂解液处理,直接加200ul溶液A,振荡至彻底混匀。2、向悬浮液中加入20ul(10mg/ml)的RNaseA,充分颠倒混匀,室温放置10min。3、加入20ul(10mg/ml)的蛋白酶K,充分颠倒混匀,65℃水浴消化30-60min,消化期间可颠倒离心管混匀数次,直至样品消化完全为止。4、加入2倍体积溶液B(使用前请先检查是否己加入无水乙醇),充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响DNA的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入股附柱中,室温放置2min,5、12000rpm离心2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。6、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。7、向吸附柱中加入500ul漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。8、12000rpm离心2min,将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。9、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜ZY悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,12000rpm离心1min。10、离心所得洗脱液再加入吸附柱中,12000rpm离心2min,即可得到高质量的基因组DNA。注意事项:1、本试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2、常用的血液抗凝剂有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制各大分子量血液基因组DNA,可优先考虑使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因为用肝素抗凝的血液提取的基因组DNA进行PCR扩增时,有PCR扩增YZ现象。3、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。4、如果试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响效果。5、绝大多数哺乳动物的全血如入全血中的红细胞无核,故在提取基因组DNA时需去除不含DNA的无核红细胞,以免影响红细胞裂解和DNA释放。如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量减少为5-20ul,不需要再用红细胞裂解液来裂解红细胞。6、洗脱缓冲液的体积**不少于50ul,体积过小会影响回收效率:洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效率。相关产品:D1850全血基因组DNA提取试剂系统E1020EB染色液D10106×DNALoadingBufferT106050×TAE缓冲液T10505×TBE缓冲液M1060D2000DNALadderM14001kbDNALadderG8142GoldViewII型核酸染色剂(5000×)全血基因组DNA提取试剂盒说明书现货促销全血基因组DNA提取试剂盒说明书现货促销ShanghaisolarbioBioscience&TechnologyCo.,LTD上海索莱宝生物科技有限公司是一家集销售生化试剂、实验耗材、自产分子生物学产品为一体,并能提供技术支持的专业性生物科技公司。公司秉承“以客户为ZX,以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念,在依靠客户的大力支持和员工的不懈努力下获得了快速的成长。公司组织结构清晰,内部管理科学,拥有一支既分工细致又高度合作的年轻化队伍,保持了各个部门之间的GX合作运转,充分保障了公司在充满竞争的市场中处于领xian地位。公司注重与业界精英合作,目前公司已经和Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf、Fluka、Hyclone、Merck、Millipore、Omega、Oxoid、Pall、Peprotech、Pharmacia、Pierce、Roche、Sigma、Serva、TBD、Whatman、GBD、ADL、R&D、RB等企业结成紧密的合作伙伴关系,代理其领xian世界的产品,并在全国各地设有分销机构。我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户提供高品质的产品和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、极具竞争力的价格,所有这些都保证了我们向您提供的是Z专业Zyou质的服务!立足北京,上海,辐射全国,随着产品营销战略的不断延伸,我们将逐步发展成为yi流的专业性生物科技公司。我们希望能够和尊敬的客户一起,利用各自的资源优势和勇于进取的敬业精神,为ZG生命科学研究的发展作出更多的贡献。为了更好、更全面的发展,现公司正在诚招各地dai理商和招聘若干销售、研发人员,欢迎垂询并期待您的加入!全血基因组DNA提取试剂盒说明书现货促销全血基因组DNA提取试剂盒说明书现货促销联系方式上海索莱宝生物科技有限公司电话:021-6485566518018609966传真:021-54261506邮编:200233地址:上海市钦江路15号14层邮箱:solarbio@126.com网址:www.shsolarbio.com全血基因组DNA提取试剂盒说明书现货促销上海索莱宝021-54100800[详细]
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2018-09-02 10:00
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动物细胞/组织活性线粒体分离试剂盒产品说明书
- 动物细胞/组织活性线粒体分离试剂盒产品说明书主要用途动物细胞/组织活性线粒体分离试剂是一种旨在从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的活性线粒体细胞器的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。适合于动物软组织(肝或脑组织)和培养细胞的活性线粒体的制备。其制备物产量高,活性保证,可以被用于线粒体酶活性、细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白水解酶和核酶,即到即用,性能稳定,分离产量和纯度堪称同类产品**。技术背景线粒体细胞器的分离是现代细胞生物学研究的Z常用的手段之一。从任何组织或细胞分离线粒体的技术方法基本上采用:**,通过机械或化学方法破裂细胞;第二,通过低速差速离心去除残渣碎屑和巨大细胞器;第三,通过高速差速离心获得线粒体;甚至,第四,可以通过等密度离心获得纯度更高的线粒体。产品内容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升净化液(ReagentC)毫升强化液(ReagentD)毫升保存液(ReagentE)毫升活性液(ReagentF)微升产品说明书1份保存方式保存净化液(ReagentC)和活性液(ReagentF)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里,有效保证6月用户自备HANK平衡盐缓冲溶液(12028)或PBS缓冲溶液(12033):用于清理细胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(12024):用于细胞脱离完全细胞培养液(12052):用于中和胰蛋白酶的细胞培养基15毫升锥形离心管:用于线粒体初步制备物的存放50毫升锥形离心管:用于细胞或组织收集后离心或清洗1.5毫升离心管:用于保存线粒体4℃台式离心机:用于沉淀细胞4℃超速离心机:用于分离细胞器成分DOUNCE匀浆器:用于裂解细胞实验步骤一、动物软组织线粒体分离(组织匀浆法)实验开始前,将试剂盒里的活性液(ReagentF)冻融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升净化液(ReagentC)和4毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升锥形离心管里,混匀后,标记为裂解工作液,放进冰槽里备用。然后进行下列操作。1.手术取出动物组织,并秤重以确定组织重量(注意:实验前**使动物空腹12至24小时)2.(选择步骤)放进预冷的50毫升锥形离心管3.(选择步骤)加入适量的(1克组织需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.即刻用刀片切碎组织5.放进一个预冷的15毫升锥形离心管6.加入预冷的xx毫升裂解工作液7.涡旋震荡5秒,充分混匀8.即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用研磨棒匀化组织(约80下)(注意:参见注意事项8)9.将所有组织匀浆物移入15毫升锥形离心管,10.放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为1500g11.小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管此步骤去除细胞核和未溶解的细胞12.放进4℃超速离心机离心10分钟,速度为10000g13.小心抽去上清液,保留沉淀颗粒此步骤获得线粒体沉淀物14.(选择步骤)加入预冷的xx毫升保存液(ReagentE)15.(选择步骤)放进4℃超速离心机再次离心5分钟,速度为10000g16.(选择步骤)小心抽去上清液17.加xx毫升保存液(ReagentE),充分混匀18.即刻移入1.5毫升离心管,放进-70℃冰箱里二、动物软组织线粒体分离(化学处理法)实验开始前,将试剂盒里的活性液(ReagentF)冻融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升净化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升锥形离心管里,混匀后,标记为裂解工作液,放进冰槽里备用。然后进行下列操作。1.手术取出动物组织,并秤重以确定组织重量(注意:实验前**使动物空腹12至24小时)2.(选择步骤)放进预冷的50毫升锥形离心管3.(选择步骤)加入适量的(1克组织需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.移入一个液氮冻存管5.即刻放进液氮罐过夜6.次日从液氮罐里取出,即刻(Z快速度)碾碎组织(注意:切莫使组织冻融)7.放进一个15毫升锥形离心管8.加入预冷的xx毫升裂解工作液9.涡旋震荡5秒,充分混匀10.在冰槽里孵育2分钟,其中每间隔一分钟涡旋震荡5秒11.加入预冷的xx微升强化液(ReagentD)12.涡旋震荡5秒,充分混匀13.在冰槽里孵育5分钟,其中每间隔一分钟涡旋震荡5秒(注意:参见注意事项9)14.加入预冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混匀15.放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为1500g16.小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管此步骤去除细胞核和未溶解的细胞17.放进4℃超速离心机离心10分钟,速度为10000g18.小心抽去上清液,保留沉淀颗粒此步骤获得线粒体沉淀物19.(选择步骤)加入预冷的xx毫升保存液(ReagentE)20.(选择步骤)放进4℃超速离心机再次离心5分钟,速度为10000g21.(选择步骤)小心抽去上清液22.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混匀23.即刻移入1.5毫升离心管,放进-70℃冰箱里三、动物细胞线粒体分离(细胞匀浆法)实验开始前,将试剂盒里的活性液(ReagentF)冻融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升净化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升锥形离心管里,混匀后,标记为裂解工作液,放进冰槽里备用。然后进行下列操作。1.准备5至10瓶75cm2细胞培养瓶的细胞(5X107),直至细胞生长铺满整个培养表面2.分别加入10毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液到每个细胞培养瓶,覆盖培养瓶表面,3.小心抽去清洗液4.重复实验步骤2至3一次5.加入3毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,铺满整个培养平面6.放进37℃培养箱孵育3分种7.手击震动培养瓶,使细胞脱落8.分别加入10毫升用户自备的完全细胞培养液9.全部移入到一个50毫升锥形离心管10.放进台式离心机离心10分钟,速度为200g11.小心抽去上清液12.加入xx毫升预冷的清理液(ReagentA),混匀细胞13.放进台式离心机离心10分钟,速度为300g14.小心抽去上清液15.加入预冷的xx毫升裂解工作液16.涡旋震荡5秒,充分混匀细胞颗粒群17.即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用研磨棒匀化细胞(约80下)(注意:参见注意事项8)18.将所有细胞匀浆物移入15毫升锥形离心管19.放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为1500g20.小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管此步骤去除细胞核和未溶解的细胞21.放进4℃超速离心机离心10分钟,速度为10000g22.小心抽去上清液,保留沉淀颗粒此步骤获得线粒体沉淀物23.(选择步骤)加入预冷的xx毫升保存液(ReagentE)24.(选择步骤)放进4℃超速离心机再次离心5分钟,速度为10000g25.(选择步骤)小心抽去上清液26.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混匀27.即刻移入1.5毫升离心管,放进-70℃冰箱里四、动物细胞线粒体分离(化学处理法)实验开始前,将试剂盒里的活性液(ReagentF)冻融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升净化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升锥形离心管里,混匀后,标记为裂解工作液,放进冰槽里备用。然后进行下列操作。1.准备5至10瓶75cm2细胞培养瓶的细胞(5X107),直至细胞生长铺满整个培养表面2.分别加入10毫升用户自备的HANK平衡盐溶液或PBS溶液到每个细胞培养瓶,覆盖培养瓶表面28.小心抽去清洗液3.重复实验步骤2至3一次4.加入3毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,铺满整个培养平面5.放进37℃培养箱孵育3分种6.手击震动培养瓶,使细胞脱落7.分别加入10毫升用户自备的完全细胞培养液8.全部移入到一个50毫升锥形离心管9.放进台式离心机离心10分钟,速度为200g10.小心抽去上清液11.加入xx毫升预冷的清理液(ReagentA)12.放进台式离心机离心10分钟,速度为300g13.小心抽去上清液14.加入预冷的xx毫升裂解工作液15.涡旋震荡5秒,充分混匀16.在冰槽里孵育2分钟,其中每间隔一分钟涡旋震荡5秒17.加入预冷的xx微升强化液(ReagentD)18.涡旋震荡5秒,充分混匀19.在冰槽里孵育5分钟,其中每间隔一分钟涡旋震荡5秒(注意:参见注意事项9)20.加入预冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混匀21.放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为1500g22.小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管此步骤去除细胞核和未溶解的细胞23.放进4℃超速离心机离心10分钟,速度为10000g24.小心抽去上清液,保留沉淀颗粒此步骤获得线粒体沉淀物25.(选择步骤)加入预冷的xx毫升保存液(ReagentE)26.(选择步骤)放进4℃超速离心机再次离心5分钟,速度为10000g27.(选择步骤)小心抽去上清液28.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混匀29.即刻移入1.5毫升离心管,放进-70℃冰箱里注意事项1.本产品为10次(1克动物组织或5X107细胞)或50次(200毫克动物组织或1X107细胞)操作2.实际操作的动物组织重量或细胞量与试剂使用量按比例调整:例如200毫克动物组织:试剂用量是标准用量的五分之一3.所有操作均须在4℃或以下状态进行4.操作时,须戴手套5.操作时,须无菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(ReagentB)和保存液(ReagentE)6.建议使用足够的样品量7.建议严格控制操作时间8.通常匀化次数为80下达到80%的细胞裂解为理想状态,但不同的组织或细胞类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升匀浆物的细胞裂解程度:完整细胞呈现发亮的圆环。低于50%可以增加匀化次数9.通常孵育5分钟达到80%的细胞裂解为理想状态,但不同的组织或细胞类型会存在差异。用户可以通过显微镜观察3微升裂解物的细胞裂解程度:完整细胞呈现发亮的圆环。低于50%可以增加孵育时间和涡旋震荡次数10.对于难以裂解的细胞,例如HeLa细胞,采用物理匀浆法是优先推荐的技术处理11.通常5X107细胞或1克动物组织的线粒体含量为50微克以上线粒体蛋白12.如果需要计量线粒体,稀释后数分钟内完成,否则线粒体将分解13.本产品所获得的线粒体纯度和产量Z为理想。通过调整10000g离心速度到3000至8000g,可以提高粗提的线粒体纯化程度,但线粒体产量相应减少14.如果需要获得99%以上纯度的线粒体,使用动物细胞/组织高质纯化线粒体分离试剂盒-10006.315.线粒体正常活性测定方法是:CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、细胞色素吸收峰谱等16.线粒体内外膜完整测定方法是:CYTOCHROMECOXIDASE活性和荧光JC染色17.本公司提供线粒体套餐:ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、线粒体溶解等18.本公司提供系列线粒体分析试剂产品质量标准1.本产品经鉴定性能长期稳定2.本产品经鉴定分离的线粒体内外膜完整3.本产品经鉴定分离的线粒体维持正常活性4.本产品经鉴定不含污染性蛋白酶和核酶[详细]
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2018-11-18 10:00
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大鼠Ⅳ型胶原剂盒使用说明书
- 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中Ⅳ型胶原(ColⅣ)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)水平。用纯化的大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Ⅳ型胶原(ColⅣ),再与HRP标记的Ⅳ型胶原(ColⅣ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的Ⅳ型胶原(ColⅣ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(96μg/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。大鼠Ⅳ型胶原剂盒使用说明书操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。48μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液24μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液12μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液6μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液3μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。大鼠Ⅳ型胶原剂盒使用说明书操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。大鼠Ⅳ型胶原剂盒使用说明书保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-27 10:00
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动物血小板线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒产品说明书
- 动物血小板线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒产品说明书主要用途动物血小板线粒体可溶性总蛋白制备试剂是一种旨在通过低速差速离心和化学渗压休克处理纯化血小板、以及物理或化学破膜和高速差速离心的方法,直接从动物血细胞中分离出完整而纯化的血小板线粒体细胞器,并在蛋白酶YZ混合剂的帮助下,使已纯化的线粒体膜结构破裂而获得线粒体内活性蛋白酶系统的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于人体和各种动物全血(鼠、猪、羊等)中血小板线粒体可溶性总蛋白的制备。可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和营养学等的研究。可直接用于特定蛋白后续纯化、蛋白一维或二维电泳、西方杂交、免疫抗体和质谱分析等等。产品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能稳定。技术背景线粒体是细胞中重要的细胞器,其主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。线粒体中含有丰富的细胞色素氧化酶系统和细胞凋亡相关蛋白等。通过机械或化学方法破裂细胞,进而差速离心获得线粒体,然后通过特殊裂解液和蛋白酶YZ混合剂防止裂解后线粒体内各种活性蛋白成分遭到活化的内源性蛋白酶的破坏,充分保留线粒体内蛋白质的免疫和生物学活性,Z后进行相关蛋白的独立分析。产品内容清理液(ReagentA)500毫升裂解液(ReagentB)80毫升净化液(ReagentC)20毫升强化液(ReagentD)10毫升保存液(ReagentE)200毫升破膜液(ReagentF)2毫升活性液(ReagentG)20微升上样液(ReagentH)3毫升产品说明书1份保存方式保存净化液(ReagentC)和活性液(ReagentG)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,有效保证6月用户自备15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器50毫升锥形离心管:用于样品操作的容器1.5毫升离心管:用于样品保存的容器4℃台式离心机:用于样品操作4℃超速离心机:用于样品操作DOUNCE匀浆器:用于裂解细胞超声仪:用于裂解细胞实验步骤物理处理法实验开始前,将试剂盒里的净化液(ReagentC)冻融,然后移出1毫升净化液(ReagentC)到4毫升的裂解液(ReagentB)里,混匀后,置入冰槽里,标记为裂解工作液。然后进行下列操作。准备1个无菌的50毫升锥形离心管轻轻混匀10至20毫升新鲜(2小时内抽取的静脉血)的抗凝全血样品移入到50毫升锥形离心管放进台式离心机离心15分钟,速度为200g小心移取上清液到新的50毫升锥形离心管,留下200微升液体,以防抽取松动的细胞颗粒群用手指轻弹离心管2至3下,使细胞颗粒群松动加入10毫升预冷的清理液(ReagentA),混匀细胞颗粒群放进台式离心机离心15分钟,速度为200g小心移取上清液合并到上述50毫升锥形离心管,留下200微升液体,以防抽取松动的细胞颗粒群(扔掉含有细胞颗粒群的离心管)放入含有上清液的离心管到台式离心机离心15分钟,速度为200g小心移取上清液到新的50毫升锥形离心管,留下200微升液体,以防抽取松动的细胞颗粒群(扔掉含有细胞颗粒群的离心管)――此步骤获得血小板富集血清放入含有上清液的离心管到台式离心机离心20分钟,速度为2000g可见白色沉淀颗粒群,小心抽掉上清液加入10毫升预冷的清理液(ReagentA),混匀细胞颗粒群放入台式离心机离心20分钟,速度为2000g小心抽去上清液(注意:如果暂时停止操作,须暂时放进-70℃冰箱里)――此步骤获得纯化的血小板加入5毫升预冷的裂解工作液涡旋震荡5秒,充分混匀细胞颗粒群即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用匀浆帮匀化细胞(约10下)(注意:参见注意事项11)将所有细胞匀浆物移入15毫升锥形离心管(选择步骤)置于超声仪枪头下,离心管在冰槽里(选择步骤)超声功率为60%(或150赫兹)猝击10秒,间隙30秒,10个循环放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为1500g小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管此步骤去除未溶解的细胞放进4℃超速离心机离心10分钟,速度为10000g小心抽去上清液,保留沉淀颗粒此步骤获得线粒体沉淀物(选择步骤)加入3毫升预冷的保存液(ReagentE)(选择步骤)放进4℃超速离心机再次离心5分钟,速度为10000g(选择步骤)小心抽去上清液加入100微升破膜液(ReagentF)到线粒体颗粒样品中加入1微升活性液(ReagentG)涡旋震荡15秒置入冰槽中孵育15分钟涡旋震荡60秒放进微型台式离心机离心2分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取上清液到新的1.5毫升离心管――此为所有可溶性线粒体蛋白系统若暂时不予后续处理,保存在-20℃冰箱里继续进行下列操作:操作一、线粒体总蛋白定量检测1)移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-30030.1)操作二、可溶性线粒体蛋白电泳1)移取20微升(1微克/微升)上清液到新的1.5毫升离心管2)加入20微升上样液(ReagentH)3)涡旋震荡15秒放进微型台式离心机离心10秒,速度为500g(或2000RPM,例如eppendorf5415)煮沸5分钟上样,进行电泳操作和西方杂交化学处理法实验开始前,将试剂盒里的净化液(ReagentC)冻融,然后移出1毫升净化液(ReagentC)到4毫升的裂解液(ReagentB)里,混匀后,置入冰槽里,标记为裂解工作液。然后进行下列操作。准备1个无菌的50毫升锥形离心管轻轻混匀10至20毫升新鲜(2小时内抽取的静脉血)的抗凝全血样品移入到50毫升锥形离心管放进台式离心机离心15分钟,速度为200g小心移取上清液到新的50毫升锥形离心管,留下200微升液体,以防抽取松动的细胞颗粒群用手指轻弹离心管2至3下,使细胞颗粒群松动加入10毫升预冷的清理液(ReagentA),混匀细胞颗粒群放进台式离心机离心15分钟,速度为200g小心移取上清液合并到上述50毫升锥形离心管,留下200微升液体,以防抽取松动的细胞颗粒群(扔掉含有细胞颗粒群的离心管)(选择步骤)放入含有上清液的离心管到台式离心机离心15分钟,速度为200g(选择步骤)小心移取上清液到新的50毫升锥形离心管,留下200微升液体,以防抽取松动的细胞颗粒群(扔掉含有细胞颗粒群的离心管)――此步骤获得血小板富集血清放入含有上清液的离心管到台式离心机离心20分钟,速度为2000g可见白色沉淀颗粒群,小心抽掉上清液加入10毫升预冷的清理液(ReagentA),混匀细胞颗粒群放入台式离心机离心20分钟,速度为2000g小心抽去上清液(注意:如果暂时停止操作,须暂时放进-70℃冰箱里)――此步骤获得纯化的血小板入5毫升预冷的裂解工作液涡旋震荡5秒,充分混匀在冰槽里孵育2分钟,期间涡旋震荡5秒一次加入500微升预冷的强化液(ReagentD)涡旋震荡5秒,充分混匀在冰槽里孵育5分钟,期间涡旋震荡5秒二次(注意:参见注意事项12)加入5毫升预冷的保存液(ReagentE),轻轻摇动试管混匀放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为1500g小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管此步骤去除未溶解的细胞放进4℃超速离心机离心10分钟,速度为10000g小心抽去上清液,保留沉淀颗粒此步骤获得线粒体沉淀物(选择步骤)加入3毫升预冷的保存液(ReagentE)(选择步骤)放进4℃超速离心机再次离心5分钟,速度为10000g(选择步骤)小心抽去上清液加入100微升破膜液(ReagentF)到线粒体颗粒样品中加入1微升活性液(ReagentG)涡旋震荡15秒置入冰槽中孵育15分钟涡旋震荡60秒放进微型台式离心机离心2分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取上清液到新的1.5毫升离心管――此为所有可溶性线粒体蛋白系统若暂时不予后续处理,保存在-20℃冰箱里继续进行下列操作:操作一、线粒体总蛋白定量检测1.移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-30030.1)操作二、可溶性线粒体蛋白电泳移取20微升(1微克/微升)上清液到新的1.5毫升离心管加入20微升上样液(ReagentH)涡旋震荡15秒放进微型台式离心机离心10秒,速度为500g(或2000RPM,例如eppendorf5415)煮沸5分钟上样,进行电泳操作和西方杂交注意事项本产品为20次(10至20毫升全血)操作其它实际操作的全血容量与试剂使用量按比例调整:例如40毫升全血,试剂用量加倍操作时,避免污染母液,尤其是裂解液(ReagentB)和保存液(ReagentE)操作时,须戴手套建议使用新鲜全血:2小时内的全血为理想状态,不要超过24小时全血样品采集须使用全血样品采集须使用EDTA二钾血液抗凝液(12059.1)、ACD血液抗凝液(12059.4),或肝素钠血液抗凝液(12059.5)建议使用足够的样品量血小板提取量因人而异;如果不足,建议增加全血量线粒体操作均须在4℃或以下状态下进行建议严格控制操作时间通常匀化次数为10下(或细胞颗粒群消失为止)达到80%的细胞裂解为理想状态。用户可以通过显微镜观察3微升匀浆物的细胞裂解程度:完整细胞呈现发亮的圆环。低于50%可以增加匀化次数通常孵育5分钟达到80%的细胞裂解为理想状态。用户可以通过显微镜观察3微升裂解物的细胞裂解程度:完整细胞呈现发亮的圆环。低于50%可以增加孵育时间和涡旋震荡次数物理处理法是优先推荐的技术处理通常每毫升全血平均可获得2X108血小板通常10毫升全血的血小板线粒体含量为10至25微克线粒体蛋白16.如果需检测不可溶性线粒体蛋白,可保留线粒体裂解后的沉淀物,直接加入10微升上样液(ReagentH)和10微升无离子水,然后继续操作二的步骤3至6本公司提供系列线粒体试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定无蛋白酶污染本产品经鉴定蛋白萃取产量高本产品经鉴定纯化程度高[详细]
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2018-11-19 10:00
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人神经丝蛋白剂盒使用说明书
- 人神经丝蛋白酶联免疫分析试剂盒使用说明书使用目的本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中神经丝蛋白(NF)含量。实验原理人神经丝蛋白剂盒使用说明书应用双抗体夹心法测定标本中人神经丝蛋白(NF)水平。用纯化的人神经丝蛋白(NF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入神经丝蛋白(NF),再与HRP标记的神经丝蛋白(NF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的神经丝蛋白(NF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人神经丝蛋白(NF)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(800ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。400ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液200ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液100ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液50ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液25ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算人神经丝蛋白剂盒使用说明书以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。[详细]
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2018-09-14 10:00
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大鼠白介素1β酶联免疫分析剂盒使用说明书
- 样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为60ng/L,40ng/L,20ng/L,10ng/L,5ng/L)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。[详细]
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2018-11-19 10:00
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全血基因组DNA提取试剂盒简介及说明书
- 全血基因组DNA提取试剂盒说明书货号:D1800规格:50T/100T保存:室温(15℃-25℃)干燥保存,复检期12个月,2℃-8℃保存时间更长。试剂盒内容:50T100TRNaseA1ml1ml×2蛋白酶K1ml1ml×2红细胞裂解液120ml120ml×2溶液A15ml25ml溶液B15ml30ml漂洗液15ml30ml洗脱液10ml20ml吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份产品简介:本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取全血基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,能够GX、专一吸附DNA,可Zda限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。操作步骤:使用前请先在漂洗液和溶液B中加入无水乙醇,加入休积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。1、样品的处理(本产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的0.lml-1ml血液样品):a、在血液样品中加入2-3倍体积的红细胞裂解液,充分颠倒混匀,12000rpm离心1min,小心吸去上清,沉淀应为白色或淡红色,如果裂解不彻底,可重复以上述步骤一次。向沉淀中加200ul溶液A,振荡至彻底混匀。b、如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量为5-20u1,不需要再用红细胞裂解液处理,直接加200ul溶液A,振荡至彻底混匀。2、向悬浮液中加入20ul(10mg/ml)的RNaseA,充分颠倒混匀,室温放置10min。3、加入20ul(10mg/ml)的蛋白酶K,充分颠倒混匀,65℃水浴消化30-60min,消化期间可颠倒离心管混匀数次,直至样品消化完全为止。4、加入2倍体积溶液B(使用前请先检查是否己加入无水乙醇),充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响DNA的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入股附柱中,室温放置2min,5、12000rpm离心2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。6、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。7、向吸附柱中加入500ul漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。8、12000rpm离心2min,将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。9、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜ZY悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,12000rpm离心1min。10、离心所得洗脱液再加入吸附柱中,12000rpm离心2min,即可得到高质量的基因组DNA。注意事项:1、本试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月,更长时间的保存可置于2-8℃。2、常用的血液抗凝剂有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制各大分子量血液基因组DNA,可优先考虑使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因为用肝素抗凝的血液提取的基因组DNA进行PCR扩增时,有PCR扩增YZ现象。3、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。4、如果试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响效果。5、绝大多数哺乳动物的全血如入全血中的红细胞无核,故在提取基因组DNA时需去除不含DNA的无核红细胞,以免影响红细胞裂解和DNA释放。如果处理的血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量减少为5-20ul,不需要再用红细胞裂解液来裂解红细胞。6、洗脱缓冲液的体积**不少于50ul,体积过小会影响回收效率:洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效率。相关产品:D1850全血基因组DNA提取试剂系统E1020EB染色液D10106×DNALoadingBufferT106050×TAE缓冲液T10505×TBE缓冲液M1060D2000DNALadderM14001kbDNALadderG8142GoldViewII型核酸染色剂(5000×)[详细]
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2018-09-02 10:00
产品样册
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动物线粒体呼吸链复合物I活性定量检测试剂盒产品说明书
- 动物线粒体呼吸链复合物I活性定量检测试剂盒产品说明书[详细]
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2024-09-17 19:14
专利
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大鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)剂盒
- 大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)水平。用纯化的大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Ⅳ型胶原(ColⅣ),再与HRP标记的Ⅳ型胶原(ColⅣ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的Ⅳ型胶原(ColⅣ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(96μg/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)剂盒使用说明书操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。48μg/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液24μg/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液12μg/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液6μg/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液3μg/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)剂盒使用说明书操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)剂盒使用说明书保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-27 10:00
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人前列腺素H2 ( PGH2 ) 酶联剂盒使用说明书
- 使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中前列腺素H2(PGH2)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人前列腺素H2(PGH2)水平。用纯化的人前列腺素H2(PGH2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入前列腺素H2(PGH2),再与HRP标记的前列腺素H2(PGH2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的前列腺素H2(PGH2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人前列腺素H2(PGH2)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(800ng/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]
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2018-10-08 10:01
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兔胰岛素样生长因子(IGF)酶联免疫分析剂盒使用说明书
- 兔胰岛素样生长因子(IGF)酶联免疫分析剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T2g/L-60g/L使用目的:本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中胰岛素样生长因子(IGF)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔胰岛素样生长因子(IGF)岛素样生长因子(IGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素样生长因子(IGF),再与HRP标记的胰岛素样生长因子(IGF)抗体,形成抗体-抗原-酶。用纯化的兔胰标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰岛素样生长因子(IGF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中兔胰岛素样生长因子(IGF)浓度。试剂盒组成标本要1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后37℃温育30分钟。30倍稀释后备用配液:将30倍浓洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静重复5次,拍干。30秒后弃去,如此加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有析出,稀释时可在浴中加温助溶,洗涤时不影响3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-04 10:00
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