精品推荐 | 翌圣荧光素酶报告基因检测试剂， 信号半衰期高达5h，高通量药物筛选无忧
引 言
荧光素酶报告基因检测试剂，作为药物研发中不可或缺的核心工具，以其实时监测基因表达和信号传递的能力，在高通量筛选、药效评估和靶点验证等关键环节中扮演着至关重要的角色。这一技术的应用显著提高了药物筛选和评估的效率，加速了新药的发现和开发过程。
荧光素酶报告基因检测原理
荧光素酶报告基因检测技术通过荧光素酶催化luciferin氧化成oxyluciferin并产生生物荧光，实现对萤火虫荧光素酶活性的定量分析。该技术在miRNA靶基因验证、启动子转录活性调控等领域具有重要应用价值。通过将目标基因的调控元件插入荧光素酶基因的上下游，构建荧光素酶报告质粒，可以转染细胞并进行相应的刺激或处理。随后，通过裂解细胞并测定荧光素酶活性，可以评估不同刺激条件下调控元件的活性变化，从而深入理解基因表达的调控机制。
单荧光素酶和双荧光素酶检测应用的差异
关于报告基因检测，主要分为单荧光素酶报告基因检测及双荧光素酶报告基因检测，具体应用中，怎么知道自己的实验是用单荧光素酶还是双荧光素酶检测系统呢?下面我们看一下两者的差异。
单荧光素酶报告基因检测系统
-
报告基因数量：萤火虫荧光素酶单一报告基因；
-
转染类型：单个报告基因质粒，转染后通过药物筛选，构建稳定表达荧光素酶的报告基因细胞株；
-
检测流程：仅需检测萤火虫荧光素酶信号，操作简单，检测周期短，适合高通量药物筛选使用；
-
应用场景分析：一般是通过构建稳定过表达单克隆细胞株，因为细胞株的表达量比较稳定，均一，不存在因转染效率及细胞活率等变异情况对实验的影响。并且操作简单，由于只检测萤火虫信号，所以数据分析更加便捷，再加上检测时间短等优势，特别适合高通量药物筛选，满足大规模样本检测的需求。
双荧光素酶报告基因检测系统
-
报告基因数量：萤火虫荧光素酶+海肾荧光素酶双重报告基因；
-
转染类型：两个报告基因质粒共转染，主要是通过瞬时转染；
-
检测流程：需要先检测萤火虫再检测海肾信号，两者的比值（Firefly/Renilla）用于最终的数据计算；
-
应用场景分析：一般是通过瞬时转染，通过共转染含有海肾荧光素酶基因的质粒作为内参，为实验提供一个基准线，从而减少细胞活性和转染效率等外在因素的干扰，通过比值计算，可以校正细胞数量、转染效率和细胞活性的变异，提高实验结果的准确性。是研究基因表达调控、信号传导途径和药物筛选等领域的重要工具。
系列产品
翌圣荧光素酶报告基因检测系列产品提供简便、高效的定量检测方案。单一组分设计简化了使用流程，高灵敏度与5小时超长信号半衰期的完美结合，满足大规模药物筛选检测需求。我们提供Bio-One Step、Steady-One Step和Bright-One Step三种产品，以适应不同灵敏度和稳定性需求。
|
产品名称 |
Bio-One Step |
Steady-One Step |
Bright-One Step |
|
产品货号 |
|||
|
应用场景及特性 |
本试剂盒在信号强度与稳定性之间做到了相对平衡。即保持了相对较高的信号强度，又在一定的时间内保持信号强度的相对稳定。 |
半衰期可持续5 h以上。尤其在前2 h发光值变化较小。适合于超高通量或384孔板检测。 |
高灵敏度，高信号强度。适合于对灵敏度有较高要求的实验。 |
|
信号半衰期 |
60 mins |
5 h以上 |
30 mins |
|
操作特点 |
一步法 |
一步法 |
一步法 |
|
上机等待时间 |
10 mins内信号基本没有变化 |
40 mins内信号基本没有变化 |
5 mins内信号基本没有变化 |
产品优势
-
信号半衰期久：信号半衰期最高可达5h，满足高通量实验需求，避免样本量多导致的首尾孔因时间差引起的信号差异，保证结果更加稳定可靠。
-
荧光信号强：信号值可达8次方，检测窗口大，为早期药物筛选和药效评估提供了强有力的数据支持。
-
操作方便：一步法操作，避免繁琐的实验流程，直接加入检测试剂，等待5mins 即可上机检测。
-
多种选择：根据应用场景不同，提供了3款不同产品，可根据实验对信号值、信号稳定性的需求进行选择。
产品数据
翌圣不同报告基因检测试剂性能比较
在稳定过表达萤火虫荧光素酶的细胞株上进行三种类型检测试剂的验证，结果显示，Bright-One Step产品拥有更高的信号值；Steady-One Step产品信号半衰期更久，信号更稳定；Bio-One Step产品拥有高信号值的同时还保持较长的信号半衰期。
图1. 翌圣不同报告基因检测试剂性能比较
翌圣Bio-One Step荧光素酶报告基因检测试剂和竞品比较
在稳定过表达萤火虫荧光素酶的细胞株上使用翌圣Bio-One Step、竞品P和竞品V同时检测，结果显示，翌圣Bio-One Step产品信号值及信号半衰期和竞品P基本保持一致，信号半衰期优于竞品V。
图2. 翌圣Bio-One Step荧光素酶报告基因检测试剂和竞品比较
翌圣Bio-One Step荧光素酶报告基因检测试剂反复冻融测试
翌圣Bio-One Step荧光素酶报告基因检测试剂经过反复冻融实验，结果显示即使经过5次冻融循环，产品性能依然保持稳定，无显著变化。
图3. 翌圣Bio-One Step荧光素酶报告基因检测试剂反复冻融测试
操作流程
直接在细胞悬液中加入试剂后用枪头吹打5次，等待5 mins，使细胞充分裂解。
上样
每孔吸取100 μL混合液（检测试剂+细胞培养基）到检测板。
荧光检测
设置酶标仪参数。将检测板放入酶标仪，震动几秒，检测即可。
产品清单
|
产品类别 |
产品名称 |
产品货号 |
产品规格 |
|
单荧光素酶报告基因检测试剂 |
Bio-One Step Luciferase Assay Kit Bio-One Step 萤光素酶报告基因检测试剂盒 |
100T/10×100T/1000T |
|
|
Steady-One Step Luciferase Assay Kit Steady-One Step 萤光素酶报告基因检测试剂盒 |
100T/1000T /10×100T |
||
|
Bright-One Step Luciferase Assay Kit Bright-One Step萤光素酶报告基因检测试剂盒 |
100T/10×100T/1000T |
||
|
双荧光素酶报告基因检测试剂 |
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 |
100T/1000T |
|
|
Dual Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit 辉光型双荧光素酶报告基因检测试剂盒 |
100T/1000T |
全部评论(0条)
推荐阅读
-
- 精品推荐 | 翌圣荧光素酶报告基因检测试剂， 信号半衰期高达5h，高通量药物筛选无忧
- 翌圣荧光素酶报告基因检测系列产品提供简便、高效的定量检测方案。单一组分设计简化了使用流程，高灵敏度与5小时超长信号半衰期的完美结合，满足大规模药物筛选检测需求。
-
- 5分钟快速检测！一步法荧光素酶报告基因检测试剂让检测更加简单高效！
- 5分钟快速检测！一步法荧光素酶报告基因检测试剂让检测更加简单高效！
-
- 新品上市 | Bio-Firefly荧光素酶报告基因检测系统-超高灵敏度和发光强度
- YEASEN推出Bio-Firefly萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒，具有高灵敏度和发光信号稳定的特点。
-
- 精品推荐 | 高效反转、高质量cDNA，用翌圣反转录试剂
- 如何做好反转录，拿到高质量的cDNA，做出漂亮的实验结果？在这其中不仅仅要把控好操作的细节，选好适合的反转录试剂也很重要！
-
- 上新 | 双荧光素酶报告基因检测服务震撼上线，开启精准基因研究新视界
- 上新 | 双荧光素酶报告基因检测服务震撼上线，开启精准基因研究新视界
-
- 翌圣GMP级别IIs型内切酶——mRNA药物疫苗研发生产首选
- 限制性内切酶被称为DNA研究中的“手术刀”，自发现以来推动了许多基础生物学研究和商业化应用的发展。在往期的文章中已经对限制性内切酶做了详细介绍：干货|限制性内切酶知多少？今天为大家介绍IIs型内切酶。
-
- 翌圣高保真酶——让序列扩增不再困难
- 小翌强烈推荐明星产品2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix(With Dye) 高保真酶预混液（10154），产品以优异的性能在高保真酶市场中杀出重围。
-
- 翌圣热启动Taq酶——性能优越，广受好评！
- Taq酶是应用最广泛的DNA聚合酶，传统的野生型Taq已经无法满足IVD市场的性能需求，需要对野生型Taq进行升级改造，翌圣双向分子酶理性设计与定向进化平台，通过基于蛋白质晶体结构的分子酶理性设计技术，和基于超高通量单细胞分选的分子酶定向进化技术，筛选到高性能Taq酶突变体，经过翌圣反复测试和客户反馈，筛选到的热启动Taq酶，性能优越，广受好评！
-
- 自动化高通量药物筛选技术为药物研发提速
- PerkinElmer也有其独特的优势，凭借在药物研发领域的积淀和强大的自动化整合优势，PerkinElmer已为全 球众多药物研发机构提供了定制化的全自动高通量药物筛选解决方案
-
- Nature Chemical Biology| 翌圣转染试剂助力大麻素受体CB1的变构调节机制研究
- 2022年5月30日,四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室杨胜勇教授团队联合生物治疗国家重点实验室/肾脏内科邵振华研究员团队在《Nature Chemical Biology》期刊(IF：15.04)在线发表了研究论文。充分运用计算机辅助药物设计的多种技术方法对大麻素受体CB1分别与正向变构调节剂ZCZ011及负向别构调节剂ORG27569的相互作用机理进行研究。
-
- 翌圣高保真酶，分子克隆的不二之选
- PCR技术已经成为生物学实验室的常备技能，荧光定量，基因测序等大家耳熟能详的技术也和PCR息息相关。微量的DNA模板在DNA聚合酶、引物的作用下，以dNTP为原料，经过数十次的热循环过程便可实现指数级的增长，耗时大约1-2小时。一个保真性好的DNA聚合酶对于这种精细又快速的实验至关重要。
-
- 翌圣8款mRNA核心原酶获得DMF备案
- 翌圣生物mRNA合成相关核心酶近日陆续收到美国食品药品监督管理局（FDA）的确认函，继T7 RNA Polymerase获得备案之后，又有八款产品的DMF资料被美国FDA接收，获得备案编号,如需引用DMF编号，请发邮件至marketing@yeasen.com提出授权申请，与您确认后，翌圣生物将向您提供DMF授权书。
-
- 精品推荐 | 快速qPCR试剂，18min完成检测！
- 可应用于分子POCT诊断，实现更快、更准、更稳的扩增
-
- 新品 | 翌圣全外显子捕获试剂重磅发布
- 针对全外显子测序，翌圣生物现推出全外探针、杂交清洗试剂盒、Blocking Oligo、Post-PCR Primer和链霉亲和素磁珠等系列产品，为您提供目标区域更加明确，覆盖度更深、数据准确性更高，也更加经济的全套捕获解决方案！
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布，观点仅代表作者本人，不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们立即通知作者，并马上删除。
②凡本网注明"来源：仪器网"的所有作品，版权均属于仪器网，转载时须经本网同意，并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱：hezou_yiqi
上海计呈教学设备有限公司
沪公网安备 31011502008050号
参与评论
登录后参与评论