Ampligase® Thermostable DNA Ligase

• 连接扩增（连接酶链反应，LCR）1-7

• 重复扩增检测（RED）。7

• 多位点同时突变。8,9

• 其他连接为基础的检测方法。

Ampligase® Thermostable DNA Ligase催化NAD-依赖的双链DNA的3'-羟基化和5'-磷酸化末端的连接反应，对热稳定。该酶来源于嗜热细菌，与传统DNA连接酶相比，该酶具有更高的活性和稳定性。65°C时该酶半衰期为48小时，95°C时在1小时以上。 
Ampligase DNA Ligase在500个以上热循环后（16个小时循环）.10 这种高稳定性保证了极高的杂交严谨性和连接特异性。Ampligase DNA Ligase无平端DNA连接活性，无RNA或RNA:DNA杂交体连接活性。 
优点

• 高热稳定性，保证可以使用更严谨的杂交温度。

• 高特异性和严谨性能够敏感检测SNPs.11

活力单位定义: 1个活力单位的Ampligase DNA Ligase指在1X Ampligase Reaction缓冲液中，45°C条件下1分钟能够催化1 µg的lambda DNA中的50% cos位点发生连接。 
Note:一个单位的Ampligase DNA Ligase等价于至少15个别处定义的 "cohesive end units"或 "nick ligation units"。4 
储存缓冲液: 50%甘油含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT和0.1% Triton® X-100。 
Ampligase 10X反应缓冲液: 200 mM Tris-HCl (pH 8.3), 250 mM KCl, 100 mM MgCl2, 5 mM NAD和0.1% Triton® X-100。 
质量控制: Ampligase Thermostable DNA Ligase的活性通过在45°C条件下连接Sma I消化后产生的平端噬菌体DNA进行检测；电泳检测连接只发生在cos位点。Ampligase DNA Ligase不含DNA外切、内切核酸酶和RNA酶活性。