新型、快速、低成本SPE法检测黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2、M1

样品制备/提取

1.牛奶、原料乳等液态奶制品

1）称取2g样品，加入2mL乙腈，涡旋混合1min

2）再加入4mL乙腈，涡旋混合1min，4000rpm，离心5min

3）取上清液4mL，作为上样液待净化。

2.奶粉等固体奶制品

1）称取2g样品，加入5mL水，涡旋混合2min，样品与水充分混匀

2）加入5mL乙腈，涡旋混合1min

3）再加入10mL乙腈，涡旋混合1min，4000rpm，离心5min

4）取上清液5mL，作为上样液待净化

3.SPE柱净化----ProElut AFT 黄曲霉毒素检测专用柱 1500mg/12mL（Cat.#65904）

1）活 化：10mL乙腈，流出液弃去

2）上 样：将上样液加入柱中（流速控制每滴/两秒），接收流出液 

3）洗 脱：10mL乙腈（流速控制每滴/两秒），收集流出液。合并步骤 （2）、（3）流出液

4）重新溶解：在40℃下用减压蒸馏将流出液浓缩至大约2mL，向旋蒸瓶中加入5mL无水乙醇，继续减压蒸馏完全干燥

5）衍 生：依次加入0.5mL正己烷和0.5mL三氟乙酸，旋好玻璃塞充分混匀衍生液，45℃静置10min。然后挥干衍生液，用10%乙腈水溶液定容至0.5mL

色谱条件 色谱柱： Diamonsil C18（2）250×4.6 mm，5 μm（Cat. #: 99603）

流动相： A:水 B：异丙醇:乙腈=3:2 1min(A:90%);5min(A:80%);15min(A:80%);20min(A:60%);21min(A:90%);30min(A:90%)

流速： 1.0 mL/min

柱温： 30 ℃

检测器： 荧光检测器，Ex:365mn；Ex:435mn

进样量： 20 μL

新型、快速、低成本SPE法检测黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2、M1

黄曲霉毒素 B1 黄曲霉毒素 B2 黄曲霉毒素 G1 黄曲霉毒素 G2 黄曲霉毒素 M1