首次发布！59种植物生长调节剂残留量的测定

本方案适用于人参、枸杞中59种植物生长调节剂的检测。

(1) 59种植物生长调节剂混合标准储备液: 50μg/mL溶于乙腈1mL，迪马标准品部提供 (Cat.#:48409);

(2) 混合标准中间液: 准确吸取1mL混合标准储备液，乙腈定容至10mL，配制成终浓度5μg/mL的混合标准溶液；

(3) 混合标准工作液: 吸取适量混合标准中间液，用乙腈稀释至终浓度100ng/mL。

取供试品，粉碎成粉末(过三号筛)，取约3g，精密称定，置50mL聚苯乙烯具塞离心管中，精密加水 10mL，涡旋使药粉充分浸润，放置30分钟，精密加入乙腈15mL，涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡(每分钟500次)5分钟，加入无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸三钠和柠檬酸氢二钠的混合粉末(4:1:1:0.5) 6.5g(Cat.#: 64521s)，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡(每分钟500次)3分钟，于冰浴中冷却10分钟，离心(每分钟4000转)5分钟，待净化。

精密吸取上清液9mL，置已预先装有净化材料的分散固相萃取净化管 [无水硫酸镁900mg、十八烷基硅烷键合硅胶(C18)450mg和硅胶(Silica)100mg (Cat.#:64745)；枸杞样品，额外加入石墨化炭(Carb) 45mg (Cat.#: 64744)]中，涡旋使充分混匀，再置振荡器上剧烈振荡(每分钟500次)5分钟使净化完全，离心(每分钟4000转)5分钟，精密吸取上清液5mL，置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至约0.4mL，加乙腈稀释至1mL，涡旋混匀，用0.22μm Nylon滤膜(Cat.#: 37177)滤过，取续滤液，即得。

备注:同方法制备基质匹配标准溶液。

(1) UPLC条件

色谱柱: Navigatorsil^TM C18，150x3.0mm，2.7μm(Cat.#: 88005) 

流速: 0.4mL/min

进样量: 10μL

柱温: 35℃

流动相: A: 0.05%甲酸溶液(含10mmol/L甲酸铵)           B: 0.05%甲酸甲醇(含10mmol/L甲酸铵)

梯度设置:

(2) 质谱条件

电离模式: ESI

扫描方式: 正/负离子扫描

检测方式: 多反应监测

电喷雾电压: 4200/-4500V

雾化气压力: 50psi

辅助气压力: 50psi

气帘气压力: 20psi

离子源温度: 500℃

(1) 人参

(2) 使用标准加入法测定人参样品中加标回收小于60%的组分

取适量标准中间液，同供试品溶液制备的处理方法 ，制备添加水平10μg/kg、20μg/kg、50μg/kg、100μg/kg和200μg/kg的系列混合对照品工作液，校正以下几种待测组分。

(3) 枸杞

(4) 使用标准加入法测定枸杞样品中加标回收小于60%的组分

取适量标准中间液，同供试品溶液制备的处理方法，制备添加水平10μg/kg、20μg/kg、50μg/kg、100μg/kg和200μg/kg的系列混合对照品工作液，校正以下几种待测组分。

注意事项: 

1、加标水平100μg/kg的样品，部分待测组分添加回收率超出了规定范围60%-130%。其中，人参样品: 矮壮素回收率15.80%、甲哌鎓回收率26.58%、吡啶醇回收率17.50%、反式玉米素回收率21.70%；

枸杞样品: 矮壮素回收率32.06%、糠氨基嘌呤回收率49.42%、甲哌鎓回收率25.20%、烯腺嘌呤回收率37.38%、吡啶醇回收率27.86%、反式玉米素回收率20.02%、6-苄氨基嘌呤回收率49.98%。

2、使用标准加入法测定以上几种待测组分，加标回收率可以达到80%-120%，在标准草案规定范围内。

3、以人参样品加标回收为例，分析了7种回收率异常待测组分的主要影响因素:

① 矮壮素: 30%硅胶吸附损失以及提取损失；

② 糠氨基嘌呤: C18填料吸附损失；

③ 甲哌鎓: 47%硅胶吸附损失以及提取损失；

④ 烯腺嘌呤: C18吸附损失和10%硅胶吸附损失；

⑤ 吡啶醇: 提取损失高达60％以上，硅胶吸附损失约25%；

⑥ 反式玉米素: C18吸附损失约45％；

⑦ 6-苄氨基嘌呤: C18吸附损失约40％。

4、如果加入石墨化炭黑，对大多数待测组分均有不同程度的吸附。客户可参考以上规律优化提取方法和净化方法。