辣椒、花椒、香辛料中Aflatoxin检测方案
时间：2021/1/27阅读：496
我们吃的美食，比如麻辣烫、火锅、麻辣小龙虾当中，*的是辣椒、花椒、麻椒、香辛料等调味料。这些调料给我们带来舌尖上的盛宴的同时，安全问题也成为关键。其中Aflatoxin是这些调料当中比较常检测的毒素。
Pribolab针对辣椒、花椒、麻椒、香辛料等复杂基质，根据【GB 5009.22-2016 食品安全，国家标准 食品中AflatoxinB族和G族的测定】，对辣椒、花椒、香辛料等基质做了Aflatoxin检测的方法验证，验证过程如下：
1检测方法
00001. （同位素稀释液相色谱法-串联质谱法）
实验步骤：
Aflatoxin混合标准工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2为1：0.25：1：0.25 ug/mL
Aflatoxin混合同位素内标工作液：13C17-AFB1：13C17-AFB2：13C17-AFG1：13C17-AFG2为0.5 ug/mL称取 5g试样+50uL混合标准工作液+40uL混合同位素内标工作液+84%乙腈 20mL→振荡30min→离心 10min（离心速度 4000r/min）→取上清液过PriboFast®MFC226固相净化柱→取4mL净化液+46mL吐温PBS稀释→将全部稀释液通过PriboFast®AFT免疫亲和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫亲和柱→弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子→用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于试管中→50℃下氮气吹至近干，用流动相复容→微孔滤膜（0.22μm）过滤，取滤液上机。
验证结果：
AFB1（%） | AFB2（%） | AFG1（%） | AFG2（%） | |
辣椒加标-1 | 104.0 | 101.1 | 96.3 | 96.0 |
辣椒加标-2 | 101.5 | 97.6 | 99.7 | 98.6 |
花椒加标-1 | 97.3 | 95.8 | 102.6 | 97.9 |
花椒加标-2 | 98.4 | 99.2 | 104.1 | 100.2 |
卤粉加标-1 | 102.9 | 96.8 | 98.0 | 95.1 |
卤粉加标-2 | 99.6 | 97.4 | 96.1 | 97.8 |
辣椒样品液质内标和外标谱图：
AFB1
AFB2
AFG1
AFG2
00001. 第二法（液相色谱法）
实验步骤：
Aflatoxin混合标准工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2为1：0.25：1：0.25 ug/mL
称取 5g试样+50uL混合标准工作液+84%乙腈 20mL→振荡30min→离心 10min（离心速度 4000r/min）→取上清液过PriboFast®MFC226固相净化柱→取4mL净化液+46mL吐温PBS稀释→将全部稀释液通过PriboFast®AFT免疫亲和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫亲和柱→弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子→用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于试管中→50℃下氮气吹至近干，用流动相复容→微孔滤膜（0.22μm）过滤，取滤液上机。
验证结果：
AFB1（%） | AFB2（%） | AFG1（%） | AFG2（%） | |
辣椒加标-1 | 90.6 | 91.1 | 86.3 | 92.1 |
辣椒加标-2 | 93.5 | 87.6 | 83.9 | 88.6 |
花椒加标-1 | 92.8 | 85.0 | 92.0 | 87.9 |
花椒加标-2 | 95.4 | 89.2 | 94.3 | 90.2 |
卤粉加标-1 | 91.0 | 86.1 | 88.5 | 85.1 |
卤粉加标-2 | 88.9 | 87.4 | 86.0 | 87.8 |
卤粉标准品和样品加标液相谱图：
采购指南：
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
STD#1081 | 2ug/mLAflatoxinB1,G1、0.5ug/mLAflatoxinB2,G2/乙腈 | 1.2mL/瓶 |
STD#1082 | 1ug/mLAflatoxinB1,G1、0.3ug/mLAflatoxinB2,G2/乙腈 | 1.2mL/瓶 |
STD#1084 | 25ug/mLAflatoxinB1,G1,B2,G2/乙腈 | 1.2mL/瓶 |
STD#1085 | 100ug/mLAflatoxinB1,G1,B2,G2/乙腈 | 1.2mL/瓶 |
STD#1080U | Aflatoxin混合同位素内标（U-【13C17】-AFB1,AFB2,AFG1,AFG2）-0.5ug/mL-乙腈 | 1.2mL/瓶 |
M2006 | PriboFast®MFC226固相净化柱 | 25T |
IAC-011-3 | Aflatoxin总量免疫亲和柱 | 25T |
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