2025国抽新增：焦糖色中4-甲基咪唑的测定

本方案适用于焦糖色中4-甲基咪唑的测定。

标准储备溶液1000μg/mL (Cat.#: 48591)：精密称取10mg 4-甲基咪唑于10mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容至刻度。

3.1 液体焦糖色

3.1.1 取10g样品于50mL塑料离心管中，加10mL 3mol/L氢氧化钠溶液，剧烈振荡混合1min，使样品充分溶解，待净化。

3.1.2 或取5g样品于50mL塑料离心管中，加5mL 3mol/L氢氧化钠溶液，剧烈振荡混合1min，使样品充分溶解，待净化。

3.2 固体焦糖色

3.2.1 取5g样品于50mL塑料离心管中，加20mL 3mol/L氢氧化钠溶液，剧烈振荡混合1min，使样品充分溶解，待净化。

3.2.2 或取2.5g样品于50mL塑料离心管中，加10mL 3mol/L氢氧化钠溶液，剧烈振荡混合1min，使样品充分溶解，待净化。

4.1 将ProElut SLE 20mL, max sample volume(Cat.#: 62506)固相支持液-液萃取柱放置在SS Rack 6-Ports For ProElut 60mL Cartridge(Cat.#: 4802)萃取装置下层，萃取柱下方连接流量控制针头，将大体积储液器(Cat.#: 4812)放置在萃取装置上层，储液器下方连接可以控制流速的考克(Cat.#: 4806)，关闭考克，备用。

将待净化液3.1.1或3.2.1全部转移至萃取柱中，当待净化液全部流入萃取柱中，开始计时，向上层储液器中加入70mL二氯甲烷，向待净化液已转移后的50mL塑料离心管中加入30mL二氯甲烷，充分润洗离心管。萃取柱中液体吸附10min后，将润洗液倒入萃取柱，待筛板上方润洗液即将流干时，打开上层储液器的考克，使二氯甲烷流入萃取柱，二氯甲烷在萃取柱上始终保持较高位置，继续向储液器中加入200mL二氯甲烷。萃取柱下方使用500mL蒸馏瓶收集全部二氯甲烷洗脱液，待洗脱液流至近干时，将蒸馏瓶取出，在35℃水浴下减压蒸馏至约1mL，用丙酮洗涤蒸馏瓶数次，洗涤液全部转移至5mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，混匀，上机分析。

4.2 将ProElut SLE 10mL, max sample volume(Cat.#: 62505)固相支持液-液萃取柱放置在SS Rack 6-Ports For ProElut 60mL Cartridge (Cat.#: 4802)萃取装置下层，萃取柱下方连接流量控制针头，将大体积储液器(Cat.#: 4812)放置在萃取装置上层，储液器下方连接可以控制流速的考克(Cat.#: 4806)，关闭考克，备用。

将待净化液3.1.2或3.2.2全部转移至萃取柱中，当待净化液全部流入萃取柱中，开始计时，向上层储液器中加入70mL二氯甲烷，向待净化液已转移后的50mL塑料离心管中加入30mL二氯甲烷，充分润洗离心管。萃取柱中液体吸附10min后，将润洗液倒入萃取柱，待筛板上方润洗液即将流干时，打开上层储液器的考克，使二氯甲烷流入萃取柱，二氯甲烷在萃取柱上始终保持较高位置，继续向储液器中加入50mL二氯甲烷。萃取柱下方使用500mL蒸馏瓶收集全部二氯甲烷洗脱液，待洗脱液流至近干时，将蒸馏瓶取出，在35℃水浴下减压蒸馏至约1mL，用丙酮洗涤蒸馏瓶数次，洗涤液全部转移至5mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，混匀，上机分析。

色谱柱：DM-WAX 30m x 0.25mm x 0.25μm (Cat.#: 7521)

进样口温度：200℃

升温程序：初始温度150℃，保持1min，以10℃/min升温至250℃，保持10min

载气：氮气，柱流速：2.0mL/min

进样方式：分流进样，分流比：30:1

进样量：1.0μL

ECD：250℃

标准系列工作液：量取1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL、3.5mL、4.0mL及5.0mL 4-甲基咪唑标准储备溶液1000μg/mL，分别置于10mL容量瓶中，用丙酮稀释到刻度，混匀，制得浓度分别为100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、250μg/mL、300μg/mL、350μg/mL、400μg/mL及500μg/mL的4-甲基咪唑标准溶液。

将标准系列工作液分别注入气相色谱仪中，测定相应物质的峰面积，以标准系列工作液中该物质的浓度为横坐标，以该物质峰面积的响应值为纵坐标，绘制标准曲线。

液体焦糖色和固体焦糖色中4-甲基咪唑检测的添加回收结果。