动物源性食品中喹诺酮检测的固相萃取方法（Copure® HLB）

一、样品提取 

准确称取牛奶 / 猪肉试样 5.00 g（精确至 0.01）于 50 mL 离 心管中，加入 10 mL EDTA-Mellvaine 缓冲液，涡旋 1 min，超 声提取 10 min，再于 4000 r/min 下离心 5 min，取上清液， 按上述步骤再提取两次，离心，合并三次上清液，用 EDTAMellvaine 缓冲液定容至 30 mL 备用。

二、SPE 柱净化（Copure® HLB，200 mg/6 mL） 

活化：净化前固相萃取柱依次使用 6 mL 甲醇活化、6 mL 水 平衡。 

上样和洗脱：取 10 mL 上清液上样，弃去流出液，加 2 mL 5% 甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，将小柱抽干，再用 6 mL 甲醇 洗脱并收集洗脱液。 

重新溶解：洗脱液于 50℃下氮吹至近干，加 1 mL 甲醇重新溶解，涡旋混匀，过 0.22 µm 有机滤膜，待上机测试。 

三、仪器条件 

设备：Waters Alliance 2695 色谱柱：InerSustain®-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器：Waters 2487 紫外检测器 检测波长：254 nm 流动相：A：乙腈   B：0.1% 甲酸水溶液 洗脱方式：梯度洗脱，见表 1 

表 1 流动相梯度洗脱