猪肉食品中氯霉素残留检测的固相萃取方法（Copure® HLB）

一、样品提取 

取均质后的 5.0 g 猪肉样品，于 50 mL 离心管中，加入 20 mL 乙酸乙酯混合 2 min，4000 r/min 离心 15 min，取上清液于另 一离心管中，再用 20 mL 乙酸乙酯重复提取残渣 1 次，合并两 次提取液，并加入 500 µL 氨水，于 45℃旋转蒸发近干，加入 500 µL 甲醇混合 1 min，加入 10 mL 4% NaCl 涡旋混匀 10 s， 加入 10mL 正己烷摇匀 20 次，4000 r/min 离心 5 min，弃去上层， 再用 10 mL 正己烷脱脂一次，Z后加入 500 µL 氨水混匀待净化。 

二、SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 

活化：依次用 2 mL 甲醇、2 mL 水活化。 

上样和洗脱：取上述备用液重力作用下过柱依次用 2 mL 水、 1 mL 甲醇 / 乙腈 / 水 / 氨水 (15:15:65:5, v/v) 淋洗小柱 并抽干，Z后用 2 mL 5% 氨化甲醇溶液洗脱小柱，收集流 出液。 

重新溶解：洗脱液于 45℃氮气吹至近干，准确加入 1.0 mL 甲醇 / 水溶液 (4:6, v/v) 溶解，涡旋混匀经 0.22 µm 滤膜过 滤，供高效液相色谱测定。

三、仪器条件 设备：Waters Alliance 2695 色谱柱：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器：Waters 2487 紫外检测器 检测波长：268 nm 流动相：A：水   B：甲醇 洗脱方式：等度洗脱，A:B=60:40 流速：1.0 mL/min 柱温：30℃ 进样量：20 µL 

四、实验结果 

表 1 添加水平为 0.5 mg/kg 猪肉基质中氯霉素 (CAP) 的添加回收结果