人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA试剂盒‌

　　以下是‌人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA试剂盒‌的详细实验使用说明，综合各品牌试剂盒通用操作流程及注意事项整理：

　　BS-1395人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA试剂盒

　　一、试剂盒组成‌

　　预包被微孔板‌：抗IDUA抗体包被的96孔或48孔板‌。

　　标准品‌：浓度梯度为0.156-10 ng/mL(具体以说明书为准)‌。

　　检测抗体‌：HRP标记的IDUA抗体‌。

　　底物溶液‌：TMB显色液‌。

　　终止液‌：酸性溶液(如2M H₂SO₄)‌。

　　洗涤缓冲液‌：20-25倍浓缩液，需稀释使用‌。

　　二、样本处理‌

　　适用样本‌：血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞裂解液、组织匀浆等‌。

　　预处理要求‌：

　　血清/血浆：离心去除杂质(1000×g，15-20分钟)，避免溶血‌。

　　组织样本：匀浆后离心取上清‌。

　　保存条件‌：短期2-8℃，长期需-20℃冻存，避免反复冻融‌。

　　三、实验步骤‌

　　试剂平衡‌：所有组分室温平衡15-30分钟(TMB需避光)‌。

　　加样‌：

　　标准品/样本每孔加50-100μL，复孔建议‌。

　　空白孔加稀释液对照‌。

　　孵育‌：37℃避光孵育1-5小时(具体时间参考说明书)‌。

　　洗涤‌：

　　弃液后每孔加洗涤液300μL，静置30秒后拍干，重复5次‌。

　　加检测抗体‌：每孔加HRP标记抗体100μL，37℃孵育1小时‌。

　　显色‌：

　　加TMB底物100μL，避光反应10-30分钟(显蓝色)‌。

　　加终止液50μL，颜色转为黄色‌。

　　检测‌：450nm波长测OD值(参考630nm校正)‌。

　　四、数据分析‌

　　标准曲线‌：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，拟合四参数曲线‌。

　　浓度计算‌：样本OD值代入曲线方程，乘以稀释倍数‌。

　　五、注意事项‌

　　质量控制‌：

　　每板需做标准曲线及复孔，CV%应<10%‌。

　　样本OD值超范围时需稀释后重测‌。

　　操作细节‌：

　　避免板孔干燥，孵育时覆盖封板膜‌。

　　加样需准，建议使用多道移液器‌。

　　保存条件‌：

　　未用板条密封保存于2-8℃或-20℃‌。

　　底物避光，终止液腐蚀性需防护‌。

　　六、技术参数‌

　　检测范围‌：0.156-10 ng/mL(灵敏度0.039 ng/mL)‌。

　　精密度‌：板内CV<8%，板间CV<10%‌。

　　注：以上资料仅供参考，如需具体品牌说明，可联系供应商获取完整文档‌。

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