应用指南｜Expi293 PRO 表达系统用于瞬时蛋白表达的替代培养容器优化方案

Expi293 PRO 表达系统是一套完整集成、高性能的表达平台，专为提升蛋白产量而设计——即便对于难度较高、传统低表达量的靶蛋白，也能实现快速、稳定的高效表达。这套系统适配性极强，可在多种培养容器中稳定运行。我们提供经过验证的容器选型、配套订购信息，以及全套优化实验方案，帮您在不同容器中都拿到稳定一致的表达结果。

• 温度：37℃

• 气体：8% CO?，湿润环境

• 摇床轨道直径：25 mm / 50 mm

• 对照：125 mL 标准摇瓶

先测试摇速 + 培养体积，让细胞生长状态匹配 125 mL 对照摇瓶，再开展转染表达。以 6 孔深孔板为例：

• 接种密度：0.5×10? 活细胞 /mL

• 培养终体积：20 mL / 30 mL / 40 mL

• 摇床条件：25 mm 轨道，转速210 / 225 / 240 rpm

• 检测时间点：生长曲线第 4、5、6 天，每日检测活细胞密度与活率

• 对照设置：与125 mL 标准摇瓶培养结果进行对比

• 筛选原则：选择生长状态最接近对照摇瓶的体积与转速组合，用于后续表达实验

• 转染时细胞密度：5×10? 活细胞 /mL

• OptiPlex 缓冲液：100 μL（10%）

• 质粒 DNA：1.0 μg

• Expi293 PRO 转染试剂：4.5 μL（0.45%）

• 补料：80 μL/mL（8%）

• 增强剂：6 μL/mL（0.6%）

• 最优体积：20–30 mL

• 表达水平：对照的 78%–100%

• 注意：40 mL 易溅液，影响通气，不推荐；确保固定防脱落。

• 最优体积：10–25 mL；支持垂直 / 倾斜放置，倾斜可装更高体积。

• 表达水平：对照的 82%–103%。

• 注意：角度不可过平，防止起泡和通气不良。

• 最优体积：250–400 mL

• 表达水平：对照的 92%–103%

• 注意：全程垂直放置，防液体接触滤帽

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