RCC 与传统单柱 Protein A 层析在系统配置和工艺步骤上完全一致，均包括平衡、上样、洗涤、洗脱、在位清洁（CIP）和再平衡等步骤。其核心区别在于运行参数的优化：
采用更短的柱床高度（通常为10 cm）
采用更短的保留时间（通常为2–3 min）
通过显著缩短单次循环时间，RCC需要在单批次内运行更多循环，从而完成与传统模式相同的处理量。
与传统20 cm柱床高度、6 min RT的标准运行模式相比，RCC具有以下优势：
在填料寿命利用率较低的场景下，可显著降低一次性填料装填体积
缩短Protein A捕获步骤的整体运行时间
降低单位抗体的Protein A填料成本
以500 L反应器、滴度5 g/L、收获步骤回收率90%为例，Protein A捕获步骤需处理的抗体总量约为2.25 kg。采用MabSelect SuRe 70填料，在不同运行模式下可获得如下对比结果：
标准模式 | RCC模式 （柱直径不变） | RCC模式 （柱直径增加） | |
柱直径 | 300 mm | 300 mm | 400 mm |
柱高 | 20 cm | 10 cm | 10 cm |
需填料体积 | 16 L | 8 L | 14 L |
保留时间 | 6 min | 2 min | 2 min |
上样量 | 61 g/L | 48 g/L | 48 g/L |
每批Cycle数 | 3 | 7 | 4 |
总运行时间 | 10.4 h | 10.1 h | 5.7 h |
体积生产效率 | 12.6 g/L/h | 26.1 g/L/h | 25.8 g/L/h |
省填料
在柱直径不变的情况下，RCC模式通过降低柱高，可将所需填料体积减少50%。对于临床阶段或批次数较少（如 ≤10 批）的生产场景，这种填料体积的显著下降能够有效降低一次性投入，同时在短RT条件下运行更多循环，可明显提升体积生产效率。
省时间
当通过增大柱直径来维持相近的填料体积时，RCC模式可进一步缩短Protein A捕获步骤的总运行时间。这一优势对于CDMO等追求生产效率和产能利用率的企业尤为重要，有助于在现有设备条件下提升年生产批次能力。
需要注意的是，当填料被高度重复利用（例如商业化大生产）时，由于短RT下动态结合载量（DBC）未被充分利用，RCC反而可能增加填料成本。因此，RCC更适合作为填料寿命利用率较低阶段的优化策略。
成功实施RCC的前提，在于选择能够在短保留时间条件下仍保持高动态结合载量（DBC）的Protein A填料。同时，填料还需具备优异的传质性能、良好的压力流速特性，以及可靠的耐碱稳定性，以支撑频繁循环与CIP清洁。
MabSelect SuRe 70填料在上述方面表现出良好的综合性能。该填料基于高度交联琼脂糖基架，粒径约50 μm，采用经工程化改造的耐碱Protein A配基。在6 min RT条件下，其QB10%可超过70 g/L；而在2–3 min RT条件下，仍可维持较高的DBC，使其非常适合低柱高、高流速的RCC运行模式。
图1：MabSelect SuRe 70、MabSelect SuRe LX 和 MabSelect PrismA 填料在不同RT下使用曲妥珠单抗的DBC，QB10%
在压力性能方面，该填料在20 cm柱高下可支持220 cm/h 的线速度；当柱高降低至10 cm时，线速度可提升至约400 cm/h（约1.5分钟 RT），为快速循环提供了充足的操作窗口。
在清洁与稳定性方面，MabSelect SuRe 70可耐受0.1–0.5 M NaOH的在位清洁（CIP），在0.1 M NaOH条件下可支持约200次循环，在0.5 M NaOH条件下仍可支持约100次循环，满足RCC下频繁清洗的需求。
综合来看，快速循环层析模式是一种无需提高设备复杂度即可显著改善Protein A捕获步骤经济性的有效手段，特别适用于临床阶段或低批次生产场景。结合在短RT下仍具高DBC和优异耐碱稳定性的MabSelect SuRe 70填料，可在降低填料用量的同时维持工艺稳健性。
在实际应用中，建议结合具体的滴度、批次数、设备限制和成本模型，对RCC与传统运行模式进行系统评估，从而选择最合适的Protein A捕获策略。
声明：本文为作者原创首发，严禁私自转发或抄袭，如需转载请联系并注明转载来源，否则将追究法律责任
全部评论(0条)
相关产品推荐（★较多用户关注☆）
3MM CHR 35X45CM 100/PK
报价：面议 已咨询 406次
PVDF 0.2UM 80x90MM 25/PK
报价：面议 已咨询 287次
PVDF 0.45UM 100x100MM 10/PK
报价：面议 已咨询 226次
3MM CHR 15X20CM 100/PK
报价：面议 已咨询 193次
3MM CHR 35X43CM 100/PK
报价：面议 已咨询 296次
Western Blottting工作流程，GE领先解决方案
报价：面议 已咨询 1958次
GB005 200x200MM 25/PK
报价：面议 已咨询 216次
PTP 0.45UM/3MM 80X90MM 10/PK
报价：面议 已咨询 242次
你可能还想看
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布，观点仅代表作者本人，不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们立即通知作者，并马上删除。
②凡本网注明"来源：仪器网"的所有作品，版权均属于仪器网，转载时须经本网同意，并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益，请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱：hezou_yiqi
热点文章
Aigtek电压放大器在管道超声导波示踪定位方法验证实验中的应用
近期话题
相关产品
在线留言
沪公网安备 31011502008050号
参与评论
登录后参与评论