采用 SURFE2R N1 平台对肌浆网钙泵（SERCA）的功能活性进行电生理学表征

本文介绍了Nanion Technologies的SURFE2 R N1平台在研究肌浆网/内质网Ca2?-ATP酶（SERCA）中的应用，包括平台特点、SERCA功能测量及相关实验结果。

SURFE2 R平台概述

·平台用途：SURFE2 R平台专为学术研究和药物开发设计，用于转运蛋白的表征和药物发现，采用基于固体支持膜（SSM）的电生理记录技术，可直接、无标记地测量电生理事件。

·平台优势：具有高灵敏度和快速数据采集能力，能高效筛选化合物，适用于详细功能分析和高通量筛选，对以新型治疗靶点为重点的药物发现项目至关重要。

SERCA的重要性及测量挑战

·SERCA功能：SERCA在维持细胞内钙平衡中起关键作用，通过将Ca2?从胞质泵入内质网或肌浆网，调节肌肉收缩、神经元信号传导和代谢控制等基本过程。

·测量难点：长期以来，SERCA的直接功能测量在技术上存在挑战。

SURFE2 R N1的关键特性

·实时记录：可进行实时电生理记录。

·无标记要求：无需标记、放射性或荧光物质。

·高灵敏度与 temporal 分辨率：具备高灵敏度和时间分辨率。

·低蛋白需求：每个传感器仅需0.1μg蛋白质即可接触任何膜。

·广泛的靶点验证：涵盖多种已验证的转运蛋白靶点。

SERCA的表征研究

·顺铂对SERCA的抑制作用：通过ATP浓度跳跃实验，测定顺铂对SERCA抑制的IC50。

·Ca2?转运和结合动力学：不同实验条件下瞬态电流的动力学研究显示，稳态前动力学随ATP和Ca2?的可用性而改变。

·Ca2?易位的pH依赖性：在不同pH下进行ATP浓度跳跃实验发现，碱性pH会抑制Ca2?易位。

·天然囊泡和微粒体中的SERCA活性：从新西兰白兔纯化的天然SR囊泡中SERCA活性是从COS-1细胞分离的微粒体中的4倍。