酸奶中地美硝唑检测的固相萃取方法（Copure® MCX）

一、样品提取 

准确称取酸奶 2.0 g 于 50 mL 离心管中加入 15 mL 乙酸乙酯， 漩涡摇匀 2 min，4000 r/min 离心 5 min，取上清液；重复 提取一次，合并清液；40℃水浴旋蒸至近干。鸡心瓶加 0.1  mol/L盐酸 3 mL，涡动 1 min，充分溶解转移至 15 mL离心管中； 向鸡心瓶加 3 mL 正己烷，手摇一分钟，转移至同一离心管中； 手摇离心管 20 次，4000 r/min 离心 5 min，弃去正己烷层。 再加 0.1 mol/L 盐酸 3 mL，涡动 1 min，合并两次盐酸溶液， 加 3 mL 正己烷重复除脂一次，除尽正己烷层，备用。 

二、SPE 柱净化（Copure® MCX，60 mg/3 mL） 

活化：MCX 柱使用前依次用 3 mL 甲醇活化、3 mL 0.1  mol/L 盐酸平衡。 

上样和洗脱：在 MCX 固相萃取柱上加入盐酸提取备用液，弃 去流出液；依次用 2 mL 0.1 mol/L 盐酸、2 mL 甲醇淋洗，弃 去淋洗液；抽干小柱；用 6 mL 甲醇 -10% 氨水溶液（6:4, v/ v）洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程保持流速 1 mL/ min）。 

重新溶解：洗脱液于 40℃氮吹至 1 mL 以下，用水定容至 1  mL，过 0.22 µm 滤膜，供 HPLC 上样测试。 

三、仪器条件 

设备：Waters Alliance 2695 色谱柱 ：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器 ：Waters 2487 紫外检测器 检测波长：319 nm 流动相：A：乙腈 B：水 洗脱方式：梯度洗脱，见表 1 

表 1 梯度洗脱条件