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DNA测序原理

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手工测序以及自动测序均属于DNA序列测定,手工测序可分为maxam-gilbert化学降解法与sanger双脱氧链终止法,事实上,目前dna序列分析的主流是自动测序。373型、377型、310型、3700和3100型等多种型号DNA测序仪均已经被美国pe abi公司生产出来了,在这几款DNA测序仪中,临床检测实验室使用Z多的一种型号要属310型。


测序原理

Sanger法测序的原理

就是结合在待定序列模板上的引物通过一种DNA聚合酶来延伸,一直到有一种链终止核苷酸掺入为止,一套四个单独的反应共同构成每一次序列测定,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)使之扩增,并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)使之终止。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3‘-OH基团,使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止,终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整,使反应得到一组长几个至千以上个,相差一个碱基一系列片断。它们具有共同的起始点,但终止在不同的的核苷酸上,可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段,凝胶处理后可用X-光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。


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化学修饰法测序原理

末段DNA片段使用化学试剂进行处理,导致碱基的特异性切割,使得一组具有各种不同长度的DNA链的反应混合物产生,经凝胶电泳分离。碱基的修饰包含在化学切割中,从其糖环上转移出修饰的碱基,断裂于失去碱基的糖环处。


现状和意义

Zda的基因组测序及研究应用ZX之一位于深圳的华大基因研究院,华大基因承担了人类基因组计划1%的工作任务,之后又对国际HAPmap计划进行了参与与完成,并且将叫做“炎黄一号”第di个ZG人也是di一个亚洲人的基因组测序完成了。


有50余个研究小组在威康信托基金会中,其是英国Zda的生物医学资助机构之一。双向障碍病、冠心病、克罗恩氏病、风湿性关节炎、高血压以及I型糖尿病和II型糖尿病等多疾病的基因的筛查这一项颇具野心的庞大计划和挑战由他们在过去的几年开展了。有24处与上述7种疾病相关的位点通过对1.7万名英国人的SNPs筛查分析,在基因组中被找到,有10个致病基因在II型糖尿病的筛查中被找到和证实。


在业内,DNA测序有着高贵的出身,其将碱基序列这一基因密码破解,融合了IT技术与基因组学,将生物信息学这一新兴学科开创和发展了出来。传统的生物学技术被以生物信息学为代表的基因技术彻底颠覆了,对生命科学未来发展潮流起到引ling作用,在YL健康、环境保护、新能源、新材料、现代农业等热门领域以它为代表的基因工程得到了广泛地应用。


2005-09-05 浏览次数:1143次
本文来源:https://www.yiqi.com/daogou/detail_3879.html
热门标签: DNA测序技术分类DNA测序电泳
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