人工合成DNA的概念和原理

基因合成是指在体外人工合成双链DNA分子的技术,与寡核苷酸合成有所不同：寡核苷酸是单链的，所能合成的Z长片段仅为100nt左右，而基因合成则为双链DNA分子合成，所能合成的长度范围50bp-12 kb。

概念

根据人们的愿望，严格的进行设计，利用体外DNA重组和转基因技术，将新的遗传特性赋予生物，将与人们需要的更符合的新的生物类型和生物产品创造出来，即是基因工程，其又称为NA重组技术，其是在在DNA分子水平前提下设计和施工的。

原理

原理是基因重组，以下为基因重组的基本工具：

1、载体

常用载体

质粒是一种双链环状DNA分子，其具有自我复制能力，于细菌染色体独立存在，裸露，其具有简单的结构，是Z为常用的载体。

其它载体

动植物病毒以及噬菌体的衍生物也能够作为载体。

条件

具有供重组DNA的鉴定和选择的基因；具有供外源DNA片段插入的一至多个限制酶切点；可以复制并稳定保存在受体细胞中。

2、限制性核酸内切酶

来源

其主要由原核生物中分离纯化出来。

功能

其可以将双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列识别出来，并且断开每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，所以专一性为其所具备。

结果

经限制酶切割产生的DNA片段末端一般有黏性末端和平末端两种形式。

3、DNA连接酶

种类

DNA连接酶有两种，分别为T4DNA连接酶和E.coliDNA连接酶。

不同点

T4噬菌体为T4DNA连接酶的来源，大肠杆菌为E.coliDNA连接酶的来源，T4DNA连接酶可以将两种末端均缝合起来，然而连接平末端具有比较低的效率。E.coliDNA连接酶仅仅可以连接双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键。

相同点

均能将磷酸二酯键连接。