苹果汁中展青霉素含量检测的固相萃取方法 (Copure®228多功能净化柱)

许多青霉能产生展青霉素，它们主要生长在水果上。展青霉素主要污染水果及其制品，尤其是苹果、山楂、梨、番茄、苹果汁和山楂片等。这种毒素会引起动物的胃肠道功能紊乱和各种不同器官的水肿和出血。展青霉素的毒性展青霉素对人及动物均具有较强的毒性作用，展青霉素对呼吸有妨害作用。摄人体内的展青霉素，通过细胞膜的透过性变化，使膜的物质移动发生异常，从而间接地引起生理呼吸异常。

展青霉素的国家标准《GB5009.185-2016食品安全国家标准食品中展青霉素的测定》限量水平液体试样在6 μg/kg检出，定量限为20 ug/kg。

本方法适用于苹果、山楂、番茄、梨果汁饮料中展青霉素的测定。参照《GB5009.185-2016食品安全国家标准食品中展青霉素的测定》。

一、样品提取

准确称取4.0 g果汁置于50 mL离心管中，加入21 mL乙腈溶液，于涡旋器中涡旋混匀10 min，在5000 r/min下离心10 min，取上清液作为样品提取液。

二、Copure®多功能净化柱净化

(1)向试管中加入10 mL样品提取液，然后加入50 uL乙酸；
(2)将228净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中并向下压净化柱至试管底端。
(3)将净化柱上部净化后的样品提取液倒出至样品瓶或者EP管中。
(4)取5 mL净化提取液，加入20uL乙酸氮吹至干，用1mL乙酸溶液(10 mL乙酸加入250 mL超纯水配制)复溶，微孔滤膜过滤，上机测试

三、实验结果

表1. 20 ug/kg苹果汁中展青霉素的添加回收结果

仪器：Waters Alliance 2695
色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)
检测器：Waters 2996 DAD 紫外检测器
检测波长：268 nm
梯度洗脱
流动相：A水 B乙腈

流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL

图1. 添加水平为20 ug/kg展青霉素检测的液相色谱图

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