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【收藏】双酚A/F/S复合免疫亲和柱助力GB 5009.305-2025食品安全国家标准 食品中双酚A、双酚F和双酚S的测定

来源:天津博纳艾杰尔科技有限公司 更新时间:2026-03-27 15:15:31 阅读量:40
导读:【收藏】双酚A/F/S复合免疫亲和柱助力GB 5009.305-2025食品安全国家标准 食品中双酚A、双酚F和双酚S的测定


双酚类化合物(Bisphenols)是一类含有两个羟基苯基的有机化合物,广泛应用于塑料、树脂和其他工业产品中。其中,双酚A(BPA)、双酚F(BPF)和双酚S(BPS)是最常见的几种。研究表明,双酚类化合物可能影响人体激素水平、生殖系统,具有致畸、致癌、致突变毒性,也会导致雌性早熟,增加患病风险,对健康产生不良影响,因此双酚类化合物的检测受到社会广泛关注。


GB 5009.305-2025 食品安全国家标准食品中双酚A、双酚F和双酚S的测定中明确规定了双酚A、双酚F和双酚S项目检测的基质、原理、前处理及分析耗材,其中双酚A/F/S复合免疫亲和柱,作为前处理重要的耗材产品,可广泛应用于肉及肉制品、乳及乳制品、水产品、谷物、蛋类、蔬菜、?果、饮料、婴幼儿配方食品和婴幼儿谷类辅助食品。



产品信息


产品亮点


国标认证

完全符合GB 5009.305-2025标准方法要求

稳准可靠

柱回收率>92%,RSD<3%

精准吸附

特异性抗体靶向捕获,抗干扰性强



产品参数

  • 储存条件: 双酚A/F/S免疫亲和柱需在2-8℃条件下储存,不得冷冻。

  • 保质期:在最佳保存温度条件下,产品有效期18个月。

  • 注意事项:为保证最佳回收率,使用前,免疫亲和柱及待检样品需于18-25℃回温。为了不影响双酚A/F/S免疫亲和柱的净化和吸附效果,该免疫亲和柱使用前需要预活化处理。活化后的免疫亲和柱请于1小时内使用。



样品前处理方法

  • 称量:称取1g(精确至0.01g)试样于50mL聚丙烯离心管中,加?50μL同位素内标混合液及50μL标准混合液;

  • 提取:加标后振荡混合静置30min,加入10mL甲醇-水(80+20)涡旋混合30s,超声提取15min,4℃下10000r/min离心10min。取上清液置于15mL PP材质刻度离心管中,40 ℃下用氮气缓缓吹至约2mL,加?8mL PBS混匀,待净化。

  • 活化:免疫亲和柱取掉上下盖,插在固相萃取缸上使液体自然流干,取1mL专用亲和柱活化剂加?柱管中,待柱中液体全部流过柱管,立即加?3mL 水淋洗小柱,待全部流出后,用10mL PBS溶液淋洗小柱(活化后的小柱要在1小时内使用);

  • 上样:将提取液全部上样过柱;

  • 淋洗:待提取液自然流干,用10mL水淋洗免疫亲和柱,待流干,真空抽干1min;

  • 洗脱:1mL甲醇洗脱小柱,15mL PP刻度离心管收集洗脱液,抽干;

  • 浓缩:收集洗脱液于40℃氮气下缓缓吹干,准确加入0.4mL甲醇,涡旋混匀10s,再加入0.6mL水,涡旋10s,10000r/min 离心5min,上清液过0.22μm尼龙滤膜,上机待测。


*免疫亲和柱使用前恢复至室温(22~25℃)

*前处理方法以玉米基质为例,如需其他基质可详询飞诺美官方客服



液相条件

  • 色谱柱:Kinetex 1.7 μm EVO C18 100 ?, LC Column 100 x 2.1 mm

  • 货号:00D-4726-AN

  • 流动相: A:水;B:甲醇

  • 流速: 0.3 mL/min

  • 柱温:40 ℃

  • 进样量: 5 μL

  • 梯度条件:



质谱条件

  • 离子源类型:电喷雾离子源(ESI)

  • 扫描方式:多反应监测负离子模式(MRM-)

  • 喷雾针电压:-4500 V

  • 离子源温度:550 ℃

  • 加热器(GS1):55 psi

  • 辅助加热气(GS2):60 psi

  • 气帘气(CUR):35 psi

  • 碰撞气(CAD):9 psi


为获得较好的稳定和灵敏度,各化合物监测离子对的去簇电压(DP)和碰撞电压(CE),目标化合物定量定性离子对参数均经过系统优化,优化信息参见表1。


表1.化合物定性、定量离子和质谱分析参数

表1中标“*”为定量离子



实验结果

  • 标准曲线:

分别准确吸取标准混合液0.10 mL、0.20 mL、0.50 mL、0.80 mL、1.00mL、2.00mL于10mL容量瓶中,加入0.50mL同位素内标混合液,用甲醇-水溶液(40+60)定容至刻度混匀。标准曲线液中双酚A和双酚F的质量浓度分别为1.00μg/L、2.00μg/L、5.00μg/L、8.00μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L,双酚S的质量浓度分别为0.100μg/L、0.200μg/L、0.500μg/L、0.800μg/L、1.00μg/L、2.00μg/L,13C12-双酚A和13C12-双酚F的质量浓度为5.00μg/L,13C12-双酚S的质量浓度为0.500μg/L。临用现配,浓度由低到高进样,以浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线见图1-3。线性回归方程见表2。


表2. 双酚A、双酚F、双酚S标准曲线


图1.双酚A标准曲线图


图2.双酚F标准曲线图


图3.双酚S标准曲线图



实验数据

表3. 柱容量加标回收实验结果


表4. 玉米基质加标回收实验结果



实验谱图

图4.玉米样品质谱图



实验结论

本实验重现了GB 5009.305-2025 食品安全国家标准 食品中双酚A、双酚F和双酚S的测定,使用双酚A/F/S免疫亲和柱结合液质联用仪的检测方法对玉米(谷物)基质进行了双酚A、双酚F和双酚S的测试。试样中的双酚A、双酚F和双酚S,用甲醇-水溶液提取,免疫亲和柱净化,Kinetex EVO C18(2.1×100mm 1.7μm)液相色谱柱进行检测,采用内标法定量。结果表明,添加水平的相对回收率在80%~120%,RSD≤10%,能够满足检测要求。



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