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高速逆流色谱,英文名为High-speed Countercurrent Chromatography,HSCCC为其简称。其为美国国立卫生院Ito博士在1982年所研制开发的一种新型的、连续高效的液液分配色谱技术。
高速逆流色谱实验操作
在进行分离纯化时,shou先往色谱柱中充满固定相,之后色谱柱就能够围绕自身轴进行自转。与此同时围绕设备中心轴进行高速公转,再往色谱柱中泵入流动相。在这以前,shou先对预先平衡好的两相溶剂中的一相进行选择,来被当作固定相,并且往螺旋管柱中充满,之后在一定的转速下高速旋转螺旋管柱,与此同时往柱内以一定的流速泵入流动相。使流体动力学平衡在体系达到以后(也就是开始流出流动相的时候),往体系内注入分离的样品。
在进样时,往一定体积的的流动相之中溶入样品组分。其组分将以其在两相中分配系数的差异为依据来使分离得以实现。与此同时,在将固定相和流动相注入以前,需要对溶剂系统进行配制,振荡充分以后静置过夜。将上下层溶剂分离。超声排气超半个小时。在完成测试以后使用氮气推出固定相,能够将保留率测得。有时因为固定相的流失造成流出液乳化,通常要求固定相的保留值比50%要大。
逆流色谱法介绍
逆流色谱法原理为以样品在两种互不混溶的溶剂之间的分配作用为依据,溶质中各组分在从两溶剂相通过过程中由于分配系数差异而分离。为一种不用固态支撑体的全液体色谱方法。以其发展历程为根据,包括高速逆流色谱,离心液滴逆流色谱以及液滴逆流色谱。在其中应用zui为广泛的为高速逆流色谱。
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