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高速逆流色谱,HSCCC为其简称。其为美国国立卫生院Ito博士在1982年所研制开发的一种新型的、连续高效的液液分配色谱技术。
高速逆流色谱影响因素
因为高速逆流色谱未不需要任何固态载体支撑的液-液色谱。对于高速逆流色谱的分离过程而言,至关重要的是其中作为固定相的液体在色谱柱中的保留程度。
shou先,对于固定相保留率,如两相密度差、粘度、界面张力等所选择的溶剂体系的影响十分大。对于固定相保留率而言,两相的密度差具有zui大的影响。固定相保留率和密度差大体上呈线性关系。
其次,固定相保留率还会受到如高速逆流色谱的转速、流速、以及柱温等一些人为能够操控的条件的影响。其中两相的混合程度取决于螺旋管柱的转速以及它产生的离心力场。所以对于界面张力较高的溶剂系统,较高的转速应当被使用,可以剧烈的混合两相,从而使分配得以促进以及使质点传递的阻力得以减少。对于界面张力较低的溶剂系统,较低的转速应当被使用,来防止过分混合导致乳化作用和流失固定相。
固定相保留率在流动相流速方面与流速平方根之间存在着线性关系。流动相流速较快对于固定相的保留非常不利,并且出峰时间太快会造成峰与峰间具有较差的分离度,并且低流速尽管能够使固相保留率的要求的提高得到满足。然而分离时洗脱时间太长,并且峰形变宽,大量的流动相会被耗费,所以对于整个分离体系至关重要的是对于合适的流速的选择。
对于固定相的保留而言,仪器的柱温所起到的作用同样不可忽视。对于亲水性强的正丁醇溶剂体系的固定相保留率来说,其温度具有较大的影响。与此同时升高温度可以使溶剂的粘度得以改变,进而使两相的分层时间受到影响。
在将溶剂体系选定了以后,有时需要对转速, 流动相流速, 进样体积三个仪器运行参数进行正交试验, 来对zui佳分离条件进行确定。分离为一种比较复杂的动态高速分配过程,其分离效率除了关系溶剂系统,分离温度、螺旋管转速、流动相流速、梯度洗脱模式及进样量、进样方式等因素也会受到其影响。
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