液相色谱仪是一类分离与分析仪器,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。液相色谱仪的组要由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
一、环境要求:
1、温度:15~30℃。
2、日温差:±3℃。
3、相对湿度:20%~85%。
4、地面:平滑、不易起尘。
5、安装场所:无震动、周围无腐蚀性介质、无电磁场干扰,操作台纵深尺寸60cm以上,避免空调直吹风,避免直射阳光。
6、推荐液相色谱仪工作台:长2米、宽0.8米,承重大于80公斤。建议离墙距离0.3米以上。
液相色谱仪一般在安装的实际空间上,还要考虑:与其它仪器间距大于60cm,液相色谱仪后面板应留有不小于50cm的空间,前面板至操作台边缘距离不小10cm;安装平稳牢固,接入了UPS电源,外壳与地线连接。
二、液相色谱仪电源要求:
1、单相交流220V,(+5%~-10%),50~60Hz,有单独的良好接地。
2、若电压不稳,需配置稳压电源,功率大于2.5千瓦。
3、准备1个合格的万用接线板,总数不小于5个扁平三角接线插座。
4、断电续电能力:断电情形,设备能持续运行1小时以上。
5、接地:安装场所应有可靠接地线装置。
三、液相色谱仪溶剂要求:
1、二次重蒸馏水,1000毫升以上(建议用0.45微米水相滤膜过滤)。
2、乙腈或甲醇(色谱纯或优级纯),1500毫升以上(建议用0.45微米有机相滤膜过滤)。
一、液相色谱仪色谱柱的结构:
1、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成:
柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接,中间放置压坏用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接,中间也放置压环用于柱接头的密封。
为了尽量减少柱外死体积,在安装色谱柱时,用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底,然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2.5mm长或其他固定尺寸)。
在液相色谱仪两端柱接头内,柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网),用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质,能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。
2、液相色谱仪色谱柱填料:
液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是依据填料类型而定。
正相柱:多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3-10μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合-CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。
反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。
常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3-10μm之间。
二、液相色谱仪色谱柱的安装:
1、拆开液相色谱仪色谱柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。
2、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。
3、按柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底,然后顺时针拧紧空心螺钉,直到拧不动为止,再用扳手继续顺时针拧1/4-1/2圈,切记不要用力过大。如液相色谱仪色谱柱通过流动相加压后有漏液现象,请用扳手继续顺时针拧1/4圈,直至不漏液为止。
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